核心问题：尽管SR8菌株已经过充分工程改造，但其木糖利用率和乙醇生产率仍存在瓶颈，难以进一步提高
关键发现：经过三轮RAGE，最佳突变株的木糖利用率提高29%，乙醇生产率提高45%（木糖消耗速率从1.16 g/L/h提升至1.50 g/L/h，乙醇生产率从0.33 g/L/h提升至0.48 g/L/h） 等 4 条
核心问题：首次在毕赤酵母中生产凡纳滨对虾胰蛋白酶原，克服重组胰蛋白酶原对宿主细胞的毒性以及蛋白不稳定导致产量低的问题。
关键发现：在BMMA培养基、高细胞密度、每12h补加甲醇诱导96h后，SDS-PAGE和Western blot确认获得29 kDa的重组虾胰蛋白酶原，浓度达14 μg/mL，占细胞外总蛋白的17%；最终OD600为82，pH为6.9，细胞外总蛋白浓度93.0 μg/mL。相比之下，BMM低密度培养未检... 等 3 条
核心问题：砷酸盐污染水体中砷酸盐的去除效率低，缺乏高效、经济的生物修复方法，特别是利用酿酒酵母作为生物吸附剂增强砷酸盐内化的研究尚未开展。
关键发现：在12,000和30,000 ppb砷酸盐缓冲液中，工程菌株特异性摄取量最高达750 μg As/g细胞，比对照提高50% 等 7 条
核心问题：解决Synechococcus elongatus PCC 7942作为蓝藻细胞工厂因严格自养和依赖人工光源而难以工业规模化的问题，探索在自然光条件下通过混合营养生长提高生物质产率。
关键发现：混合营养培养的转化株（1%葡萄糖）生物质产率比自养转化株高3.4倍（0.27±0.007 vs 等 3 条
核心问题：缺乏在线监测系统导致重组蛋白生产在摇瓶筛选过程中信息不完整，无法预测和优化产量。
关键发现：非诱导条件下8个克隆的OTR峰值均为65-75 mmol/L/h 等 5 条
核心问题：鉴定黄色黏球菌中替代异戊酰辅酶A生物合成途径的额外参与者，并阐明其功能。
关键发现：['在野生型DK1622中，D3-亮氨酸掺入geosmin的比例为5%，而在liuA、liuB、liuC突变体中均未检测到标记，表明亮氨酸降解途径被完全阻断。', '在bkd突变体DK5643中饲喂[D6]DMAA后，D5-和D10-geosmin掺入率分别为7%和78% 等 3 条
核心问题：克隆、表达和纯化来自Citrobacter braakii的P450cin（CYP176A1）的假定氧化还原伴侣cindoxin（Cdx），并表征其生化特性，以及在体外重构P450cin催化体系，尽管其天然还原酶Cdr无法功能性表达。
关键发现：Cdx纯度>95%，A456/A280为0.67 等 7 条
核心问题：探究空肠弯曲菌PglB寡糖转移酶对合成脂联寡糖底物的识别与转移，明确其对天然和非天然寡糖的底物特异性。
关键发现：PglB可转移Bac1和GalNAc2Bac1至共有序列肽段：BODIPY肽5的Km为17±6 μM（三糖供体） 等 6 条
核心问题：系统梳理葡萄球菌属产生的生物活性次级代谢物（包括核糖体合成和翻译后修饰肽、非核糖体肽、萜烯和铁载体等）的化学多样性、生物合成途径、作用机制及工业化应用潜力，并探讨如何挖掘尚未表征的隐性生物合成基因簇。
关键发现：葡萄球菌可耐受 等 3 条
核心问题：非传统来源（菠萝蜜种子）淀粉的生物乙醇生产过程中，缺乏高效且可分泌表达的生淀粉降解α-淀粉酶，且传统淀粉液化和糖化过程能耗高。
关键发现：克隆的 blamy-I 基因全长 1539 bp，编码 512 个氨基酸，成熟蛋白 Blamy-I 含 483 个氨基酸，SDS-PAGE 显示分子量约 等 12 条
核心问题：实现黑曲霉IA-001来源的木聚糖酶基因xynB在毕赤酵母中的高效异源表达，获得高活性、适于工业应用（尤其是动物饲料添加剂）的木聚糖酶。
关键发现：摇瓶水平重组酶活达1280 U/ml，比pPICZαA表达高1.5倍，比原始黑曲霉菌株高19.39倍 等 6 条
核心问题：鉴定并改造能够输出禾谷镰刀菌（Fusarium graminearum）产生的单端孢霉烯族毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）及其乙酰化衍生物15A-DON的转运蛋白，以开发作物抗镰刀菌策略。
关键发现：Pdr5p是PDR网络中唯一能输出DON和15A-DON的转运蛋白 等 3 条
核心问题：大肠杆菌中重组膜蛋白表达量低、易错误折叠，限制膜蛋白结构与功能研究，需要开发提高功能性膜蛋白产量的策略。
关键发现：使用TF缺陷(Δtig)菌株使膜整合蛋白产量提高3-7倍：ZraS提高>3倍、HtdR提高2.6倍、pSRII提高3.4倍 等 6 条
核心问题：解析 Gcr1p/Gcr2p 转录因子突变导致的低糖酵解活性如何影响酵母其他代谢通路（尤其是 TCA 循环和呼吸链）的基因表达
关键发现：在葡萄糖条件下，gcr1 和 gcr2 突变体中大多数糖酵解基因表达显著降低，例如 GPM1 的 log2 ratio 分别为 -3.62 和 -3.94，ENO2 为 -4.64 和 -2.92，PGK1 为 -1.92 和 -2.37；而 TCA 循环和呼吸基因上调，如 CIT1 在 gc... 等 14 条
核心问题：异源类胡萝卜素生产对酿酒酵母生理和转录组的影响，尤其是高产类胡萝卜素诱导的多效药物耐药（PDR）应激反应的机制
关键发现：Orange01菌株在恒化培养中总类胡萝卜素为211 μg/g干重，其中β-胡萝卜素占89% 等 6 条
核心问题：酿酒酵母在葡萄糖存在时优先消耗葡萄糖并抑制其他碳源代谢，导致混合碳源无法同时利用。如何通过敲除HXK2解除葡萄糖抑制，实现多种碳源与葡萄糖的共消耗。
关键发现：hxk2缺失菌株在葡萄糖/乙醇混合物中最大比耗氧速率达900 μmol·min⁻¹·(g protein)⁻¹，是其在葡萄糖上氧化生长的4-5倍，是亲本菌株在乙醇上（完全去抑制）的3倍，是亲本在葡萄糖上（呼吸抑制）的近10倍。在葡萄糖/蔗糖混合培养中，hxk2缺失菌株RQ接近1，表明完全氧化生... 等 7 条
核心问题：如何通过代谢工程提高酿酒酵母中亚硫酸盐的形成，以满足食品和饮料工业对亚硫酸盐的需求，同时避免对细胞代谢的副作用。
关键发现：MET14过表达使亚硫酸盐产量提高7倍（麦芽汁中达14 mg/l） 等 7 条
核心问题：酿酒酵母无法高效降解L-苹果酸，而苹果酸-乳酸发酵过程不稳定且不适用于某些芳香型葡萄酒品种，需要构建能进行苹果酸-乙醇发酵的重组酿酒酵母菌株以在酒精发酵期间降酸。
关键发现：携带质粒的mae1/mae2重组菌在合成葡萄汁中3天内降解8 g/L L-苹果酸，在霞多丽葡萄汁中11天内降解6.75 g/L 等 5 条
核心问题：解析Fusarium sporotrichioides和Fusarium graminearum中单端孢霉烯（trichothecene）生物合成基因簇的遗传组成与功能，解释两物种产生不同毒素（T-2 toxin与DON）的分子基础。
关键发现：重新测序了F. sporotrichioides的trichothecene基因簇（22,037 bp），修正了33处序列错误 等 5 条
核心问题：在毕赤酵母中高效表达功能性哺乳动物膜转运蛋白，比较组成型启动子P_GAP与诱导型启动子P_AOX1的表达效果。
关键发现：构建的GAP-rP2克隆对^3H-D-Phe-Ala的摄取速率比对照高140倍 等 5 条