核心问题：使用量子化学簇方法模拟酶活性位点，以再现和解释酶的对映选择性，以柠檬烯环氧化物水解酶为测试案例。
关键发现：野生型LEH催化环戊烯氧化物水解的能垒分别为15.7(C1)和15.6(C2) kcal/mol，能垒差仅0.1-0.2 kcal/mol，与实验14% ee（R,R型）一致；突变体R1的C2能垒13.1 vs C1 等 5 条
核心问题：探讨萜烯合酶催化的碳正离子环化/重排中，底物固有反应性所扮演的角色，并验证基于气相量子化学计算预测的机理准确性。
关键发现：对trichodiene synthase，计算表明经中间体B的路径能垒约20 kcal/mol，而经A→D→E的质子转移路径能垒仅约8 kcal/mol，更合理 等 6 条
核心问题：评估一系列羰基还原酶对OPBE不对称还原的立体选择性，并探究酶-底物-辅因子相互作用如何决定还原产物的构型。
关键发现：在30个被测试的羰基还原酶中，约30%（9个）产生(S)-HPBE，其余主要产生(R)-HPBE。SeCR（来自酿酒酵母）催化OPBE还原为(R)-HPBE，转化率>99%，e.e.>99%，比活力29.0 U/mg，Km为0.22 mM，kcat为2.45 s⁻¹，kcat/Km为11.14... 等 2 条
核心问题：发现和表征具有新底物特异性的自足型细胞色素P450单加氧酶，特别是能催化非活化C-H键区域和立体选择性羟基化的酶。
关键发现：通过基因组挖掘发现并鉴定了来自Labrenzia aggregata IAM 12614的自足型P450单加氧酶CYP116B4（P450LAMO），其与P450RHF和P450SMO分别有60%和62%的同源性。纯化后的P450LAMO对p-氯硫代苯甲醚的比活力为7.0 U g^-1，较粗提... 等 8 条
核心问题：寻找能够在有机溶剂尤其是DMSO存在下保持活性的醇脱氢酶，用于酮的不对称还原。
关键发现：PpADH利用2-丙醇(5% v/v)作为氢供体，可立体选择性还原多种酮，对芳香酮和α-氯苯乙酮等底物给出>99% ee 等 6 条
核心问题：萜烯合酶催化的关键瓶颈是疏水性产物在水相中的溶解度极低（单萜溶解度仅10-30 mg/L），产物释放步骤比酶促反应慢约40倍，导致整体反应速率受传质限制，批量反应转化率低且酶易聚集失活。
关键发现：在0.45 mm内径管中，GDS催化FDP生成大根香叶烯D的转化率从17%（无超声）增至52%（超声），但流量降低至1 h时转化率降至10% 等 5 条
核心问题：解决酶法生产(R)-苯乙酰基甲醇（PAC）中部分纯化丙酮酸脱羧酶（PDC）稳定性差和成本高的问题，评估使用Candida utilis全细胞作为PDC来源的可行性。
关键发现：在50 mM苯甲醛和4°C下，全细胞PDC的半衰期为228 h，部分纯化酶仅24 h 等 4 条
核心问题：CYP109B1是一种具有工业应用潜力的P450单加氧酶，但此前缺乏对其底物谱、电子传递伙伴和氧化特性的系统研究。本文旨在通过体外重构和底物筛查，全面表征该酶的底物选择性、电子传递需求及其区域选择性氧化能力。
关键发现：CYP109B1表达产量为3570 nmol/L（160 mg/L） 等 8 条
核心问题：传统化学法合成光学纯叔醇需要使用有毒试剂和极端条件，缺乏绿色可持续且高对映选择性的方法；生物催化虽为可持续途径，但多数酶对位阻较大的叔醇底物活性低，底物谱有限。
关键发现：酯酶BS2野生型对叔醇E=42，突变体G105A和E188D使E>100 等 3 条
核心问题：如何高效、选择性地将大宗人参皂苷Rb1转化为药理活性更高的稀有皂苷20(S)-Rg3，现有微生物转化方法存在选择性差、底物浓度低、产物不纯等问题。
关键发现：重组β-葡萄糖苷酶Tpebgl3在LB培养基中活性约21 U/mL 等 8 条
核心问题：从土壤宏基因组中发掘新型酮还原酶（KRED），用于不对称还原前手性羰基化合物以制备光学活性醇，解决现有酮还原酶对映选择性和催化效率不足的问题。
关键发现：三个酮还原酶（KRED424、KRED432、KRED433）最适温度为55°C，最适pH为7 等 10 条
核心问题：鉴定氧化葡萄糖杆菌中的两个旧黄酶同源物（GYE1和GYE2），并研究其对柠檬醛的加氢还原能力，特别是立体选择性还原柠檬醛顺式异构体（neral）为香茅醛。
关键发现：GYE1和GYE2与酵母OYE1的序列一致性分别为30%和31%，相似性分别为43.5%和44% 等 5 条
核心问题：缺乏商业来源的同位素标记异戊二烯二磷酸盐中间体，需要一种简单高效的方法合成13C标记的IPP、DMAPP及FPP，用于生物合成途径研究。
关键发现：从乙基[2-13C]溴乙酸酯和[1,3-13C2]丙酮合成了[2,4,5-13C3]IPP和DMAPP 等 4 条
核心问题：如何利用自然界启发的多酶级联反应代替单步化学转化，以绿色、高立体选择性的方式构建哌啶、吡咯烷、多肽生物碱及聚醚等高价值复杂化合物。
关键发现：['niraparib关键中间体37通过ATA-301催化获得82%产率和>99% ee', '1,5-二酮39a-e的ω-转氨酶区域选择性单胺化反应在多数情况下达到>99% ee，氢化后得到>99% de的顺式哌啶', '(+)-dihydropinidine及其对映体经两步化学酶法分别以9...
核心问题：如何利用廉价易得的环己醇为原料、仅以空气为氧化剂，通过一锅双酶催化反应直接合成ε-己内酯，并解决高底物浓度下转化率显著下降的问题。
关键发现：在底物浓度20、40、60 mM时，ε-己内酯转化率分别为97%、97%、94%，60 mM时产物浓度达6.45 g/L 等 5 条
核心问题：已知烯还原酶（ERs）反应速率低、总转化数（TTN）不高，限制了其在制备级不对称还原活化烯烃中的应用，亟需发现新的高效、高立体选择性烯还原酶。
关键发现：CIER为NADPH依赖的含FMN黄素蛋白，二聚体结构（亚基45kDa，天然分子量79kDa） 等 6 条
核心问题：天然产物紫杉烷类化合物糖基化区域选择性差的问题，以及如何通过微生物催化获得新的二糖紫杉烷衍生物
关键发现：三个新的二糖紫杉烷化合物4-6均由底物1-3经E. cloaceae催化在木糖基4''-OH引入α-D-葡萄糖而得，产率分别为3.0%（4，8.0 mg）、5.2%（5，6.1 mg）、4.6%（6，8.1 mg） 等 4 条
核心问题：甜叶菊苷作为最丰富的甜菊糖苷，其苦味和余味限制了在食品中的应用，需要一种高效的方法通过酶法糖基化改善其味觉特性。
关键发现：在最优条件（31 mM甜叶菊苷、524 mM蔗糖、10 U/ml Gtf180-ΔN-Q1140E，37°C，3h）下，甜叶菊苷转化率达95%，生成28 mM（约50 g/L）α-葡萄糖基化产物。产物中单糖基化Stev-G1占32.5%，其余为多糖基化产物。主要产物结构为C-19位葡萄糖基(α...
核心问题：利用葡聚糖蔗糖酶的受体反应合成水杨苷类似物，并评价其抗凝血活性。
关键发现：利用水杨苷、水杨醇和苯酚作为受体，分别产生超过15、9和3种受体产物 等 2 条
核心问题：THCAS作为植物源复杂酶，在异源宿主中表达量低、活性不足，无法满足生物催化剂在化学合成THC中的应用需求。
关键发现：在2 L发酵罐中，THCAS生产最终生物量达93 g_CDW/L，总蛋白472 mg/L，总活性2 U，最大比活9.2 U/g总蛋白（41.5 h），90 h后为3.3 U/g 等 5 条