核心问题：不同异源表达系统对同一植物单萜醇合酶（甜罗勒香叶醇合酶GES）产物特异性的影响，以及宿主细胞背景是否导致酶催化产物谱的改变。
关键发现：在葡萄（V. vinifera）中GES表达产物为93%香叶醇、3%香茅醇、4%橙花醇，香叶醇含量50.7±17.6 μg/g叶片 等 5 条
核心问题：现有酶无法特异性地水解原人参二醇型人参皂苷C-3位外侧葡萄糖，导致稀有人参皂苷（如gypenoside XVII、化合物O等）难以高效、无副产物地生产。
关键发现：重组β-葡萄糖苷酶比活为233.3 U/mg，纯化6.3倍，回收率25%；亚基分子量约51 kDa，天然酶为206 kDa四聚体；最适pH 等 4 条
核心问题：1,3-丙二醇生物合成中辅因子NADH不足和多种副产物（如2,3-丁二醇、甲酸等）抑制细胞生长并降低产量，且副产物增加下游纯化难度。
关键发现：摇瓶发酵中1,3-PD产率达0.74 mol/mol甘油，高于理论产率0.72 等 6 条
核心问题：解决大肠杆菌微生物生产牻牛儿醇（geraniol）时其毒性对宿主的抑制，以及牻牛儿醇耐受机制不明的问题，为开发耐受菌株提供依据。
关键发现：通过鸟枪文库筛选获得5个牻牛儿醇耐受克隆，其中pBBL1b-18使大肠杆菌DH5α在4%(v/v)牻牛儿醇下的菌落形成效率(CFE)提高约10^4倍 等 2 条
核心问题：利用酿酒酵母从葡萄糖从头合成β-紫罗兰酮，并解决多基因共表达的稳定性和协调性问题，探索2A多顺反子表达系统在酵母代谢工程中的应用。
关键发现：T2A序列在酿酒酵母中有效介导GFP和LEU2-HA分离，Western blot检测到29.0 kDa GFP-2A和40.5 kDa Leu2-HA 等 7 条
核心问题：酿酒酵母纤维二糖发酵效率低，由于β-葡萄糖苷酶的转糖苷活性导致纤维寡糖积累，降低乙醇产量和得率，需发掘新的纤维二糖转运蛋白和β-葡萄糖苷酶以改善发酵性能。
关键发现：在微好氧批次发酵中，工程菌S. cerevisiae Pc.ST/Tt.BG达到最终乙醇浓度14.5±0.5 g/L，乙醇得率0.37±0.01 g/g纤维二糖，生产力0.30±0.01 g/L/h，纤维二糖消耗速率0.98±0.04 g/L/h 等 2 条
核心问题：表征来自 Marivirga tractuosa 的醛酮还原酶（AKR）的分子酶学特性，实现其将全反式视黄醛（all-trans-retinal）还原为全反式视黄醇（all-trans-retinol）的生物转化，并阐明该酶不能催化逆反应的分子机制。
关键发现：重组 M. tractuosa AKR 以 72 kDa 二聚体形式存在，亚基约 37 kDa 等 5 条
核心问题：谷氨酸棒杆菌（Corynebacterium glutamicum）是生物素营养缺陷型，缺乏生物素合成途径中的关键酶（如BioF）及前体合成能力，导致在不添加生物素的培养基中无法生长和生产目标产物，增加了工业发酵成本。
关键发现：['表达大肠杆菌bioF的C. glutamicum WT在添加20 mg/L pimelic acid时可无生物素生长，但单独表达bioF或bioFCH均不能实现生物素原养型', '异源表达枯草芽孢杆菌bioWAFDBI使C. glutamicum WT在无生物素培养基中稳定生长8次传代，约...
核心问题：大肠杆菌中香叶醇产量低，且内源脱氢和异构化导致香叶醇转化为其他香叶醇类副产物，影响产量和纯度。
关键发现：重组共表达大肠杆菌GPPS（ispA S80F突变）和肺炎链球菌MVA途径下游（pSTKSN12Didi）后，香叶醇产量为13.3 mg/L 等 6 条
核心问题：酿酒酵母缺乏高效的单萜合成能力，甲羟戊酸途径通量弱，GPP前体供应不足，导致香叶醇产量低，且关键限速步骤不明确。
关键发现：野生型香叶醇合酶表达产量仅0.52 mg/L 等 8 条
核心问题：评估烟草毛状根作为生产萜类吲哚生物碱（TIA）途径第一步香叶醇的平台，因为烟草毛状根天然不产生香叶醇，需要通过异源表达和生物反应器放大验证其可行性。
关键发现：在20个表达VoGES的毛状根克隆中，游离香叶醇平均含量为13.7 μg/g DW，最高为31.3 μg/g DW 等 3 条
核心问题：丙酮丁醇梭菌对D-木糖的天然利用效率较低，影响木质纤维素生物质在ABE发酵中的应用，需要提高其D-木糖利用能力。
关键发现：重组菌824-TTRR在132 h消耗约34 g/L D-木糖，对照菌824-P仅消耗24 g/L；溶剂产量：丙酮3.11 g/L vs 等 5 条
核心问题：谷氨酸棒杆菌自然合成类胡萝卜素，但能否通过代谢工程使其生产倍半萜(+)-缬兰烯尚属空白；同时(+)-缬兰烯对菌株具有毒性，且其前体法尼基焦磷酸供给不足。
关键发现：['仅异源表达甜橙缬兰烯合酶CsTPS1不能使谷氨酸棒杆菌产(+)-缬兰烯（<0.02 mg/L）', '在ΔcrtEΔidsA菌株中异源表达酿酒酵母ERG20和甜橙合酶（VLC1）产量为0.15±0.01 mg/L（20±1 μg/g CDW）', '在ΔcrtEΔidsA菌株中异源表达大肠...
核心问题：如何通过系统代谢工程改造酿酒酵母，提高异戊二烯这一重要合成橡胶单体的生物合成产量，以替代高能耗、高成本的石油基生产路线。
关键发现：['最终工程菌株YXM10-ispS-ispS在好氧条件下、以0.6%蔗糖+1.4%甘油为碳源时，异戊二烯产量达到37 mg/L，比亲本菌株BY4741-ispS（47 μg/L）提高约782倍', '过表达tHMG1后，异戊二烯产量从47 μg/L提高到90 μg/L（提升91%），但角鲨烯... 等 4 条
核心问题：解析辐射抗性细菌Hymenobacter swuensis的完整基因组，并鉴定与2'-羟基类胡萝卜素生物合成相关的基因特征
关键发现：Hymenobacter swuensis的完整基因组由一条环状染色体（4,904,241 bp）和三个质粒（pHsw1: 299,298 bp 等 6 条
核心问题：植物细胞区室化机制理解不足，导致重组蛋白和次生代谢产物过量生产失败；青蒿素在黄花蒿中天然积累于腺毛质外体，依赖自噬和非经典分泌，在悬浮细胞中难以实现稳定积累，需要通过对内膜系统进行工程改造来捕获并稳定目标代谢物。
关键发现：建立了黄花蒿G6悬浮细胞原生质体高效转化体系，转化效率约50%或以上 等 5 条
核心问题：如何利用光合微生物蓝藻直接从CO2光合生产挥发性萜类化合物柠檬烯，并实现可持续高效生产。
关键发现：LMSox菌株柠檬烯产率为41 μg/L/day，LMSox-MEPox菌株产率为56 μg/L/day，提高了1.4倍 等 5 条
核心问题：BPO-A1卤过氧化物酶在工业应用中热稳定性和有机溶剂稳定性不足，需要提高其稳定性和活性。
关键发现：从约1000个突变体中筛选出HT177和HT507两个热稳定性提高的突变体。在80°C孵育1h后，HT177和HT507的残余活性分别为20.4%和44.2%，是野生型（8.7%）的2.3倍和5.1倍。HT177在40% 1-丙醇中的残余活性为55.4%（野生型25.9%），且在甲醇、乙醇、D... 等 4 条
核心问题：开发全细胞双氧化正庚烷合成手性醇和庚酮的工艺，克服体外酶催化中辅因子再生和成本高的问题
关键发现：人工操纵子共表达系统使P450 BM3 CM1NADH表达量达81 mg g^-1 CDW 等 6 条
核心问题：3-羟基丙醛（3HPA）对Lactobacillus reuteri的毒害作用导致甘油生物转化生产3HPA的产量和生产率较低，需要开发原位产物回收方法以减轻产物抑制。
关键发现：['在71.54 mM 3HPA初始浓度下，树脂最大吸附容量达9.48 mmol/g树脂。', '吸附等温线符合S-曲线模型，低浓度下以化学吸附为主，高浓度下伴随物理吸附。', '静态批式吸附24小时可达4.15 mmol/g树脂，吸附量为初始加载量的38%。', '连续柱吸附中，在107.1... 等 5 条