核心问题：实现Fibrobacter succinogenes截短1,3-1,4-β-D-葡聚糖酶在毕赤酵母中的高水平分泌表达，克服野生型基因表达量低的问题。
关键发现：密码子优化共改变189个核苷酸，信号肽和葡聚糖酶G+C含量分别调整为48.3%和48.8% 等 6 条
核心问题：开发微生物发酵法生产(全E)-型异戊烯醇（FOH、NOH、GGOH），避免化学合成产生异构体混合物，并实现高效生产。
关键发现：['过表达HMG1在ATCC 200589中使FOH、NOH、GGOH产量分别达到8.2、0.15、0.25 mg/L', '在AURGG101中过表达HMG1使FOH产量达35.6 mg/L，约为ATCC 200589的4倍', '使用GAL1启动子在ATCC 200589中过表达HMG1时...
核心问题：在厌氧条件下，5-羟甲基糠醛（HMF）的还原分别由NADH和NADPH依赖的酶催化，不同辅因子偏好是否影响酿酒酵母的产物分布和发酵性能尚不清楚。
关键发现：在含2 g/L HMF的合成培养基中，ADH6菌株比生长速率最高（0.20 h^-1），mut-ADH1菌株为0.17 h^-1，对照为0.11 h^-1 等 6 条
核心问题：Dunaliella salina在胁迫条件下积累大量β-胡萝卜素，但其类胡萝卜素生物合成相关基因的分子基础和调控机制尚不清楚。
关键发现：分离得到D. salina Lcy-β全长cDNA，长1910 bp，开放阅读框84-1835 bp，编码584个氨基酸，预测分子量64.5 kDa 等 3 条
核心问题：微生物中法尼醇和香叶基香叶醇等异戊二烯醇产量低，如何通过调控萜类下游代谢提高其积累
关键发现：在Candida glabrata NBRC 0005中，40 mg/L SQI-2使法尼醇产量达14.98 mg/L，约为对照（0.57 mg/L）的50倍 等 4 条
核心问题：微好氧或厌氧条件下重组大肠杆菌中PHB合成基因表达下调导致PHB含量低，需要筛选有效的厌氧启动子来驱动phbCAB操纵子，实现低氧条件下的高效PHB生产。
关键发现：重组E. coli JM109(pWYC09)（P_adhE驱动phbCAB）静置培养48h后PHB含量达48%（细胞干重），较天然启动子pBHR68的30%提高60% 等 5 条
核心问题：在大肠杆菌异丁醇生物合成途径中，比较三种醛还原酶/醇脱氢酶基因对异丁醇产量的影响，并选择最适合的酶。
关键发现：删除yqhD使异丁醇产量下降80% 等 5 条
核心问题：异源宿主中工程化异戊二烯（萜类）代谢的前景与局限，特别是如何提高青蒿素、紫杉醇等复杂萜类化合物的产量。
关键发现：Lavandula latifolia中过表达DXS使叶片精油增加4.6倍、花中增加1.74倍 等 8 条
核心问题：消除肺炎克雷伯氏菌发酵生产1,3-丙二醇过程中副产物（乙醇、乳酸、琥珀酸、2,3-丁二醇等）的形成，特别是沸点相近、难分离的2,3-丁二醇。
关键发现：突变株AK和AR在甘油培养基中仅利用30%的甘油，而亲本Cu利用100% 等 5 条
核心问题：在基于Pseudomonas putida S12的生物转化过程中，糖底物大量用于生成能量和还原力而非生物量和产物，导致成本高；论文旨在通过引入C1化合物（甲醛/甲醇）作为廉价辅助底物，提高生物量产率并改善过程经济性。
关键发现：在不添加甲醛时，葡萄糖为碳源的生物量产率为35% (C-mol biomass/C-mol glucose) 等 8 条
核心问题：昆虫病原真菌中香叶基香叶基二磷酸（GGPP）合酶基因未被克隆和功能验证，限制了利用该类真菌生产萜类活性化合物。
关键发现：从5种昆虫病原真菌中扩增出GGPP合酶同源物，其中M. anisopliae和B. bassiana含有至少两种类型（ggs1和ggs2） 等 5 条
核心问题：提高酿酒酵母中D-葡萄糖进入磷酸戊糖途径（PPP）的通量，以实现D-核糖和核糖醇的高效生产。pgi1缺陷菌株无法在葡萄糖上生长，且PPP通量有限，导致产率不高。
关键发现：CEN.PK2-1D菌株同时表达gapB和DOG1，在20 g/L D-果糖和4 g/L D-葡萄糖条件下，产生约0.4 g/L D-核糖和核糖醇 等 3 条
核心问题：研究在分批培养中，通过定向限制次级底物（磷酸盐、钾、镁）将代谢通量从生物量产生转向产物形成，以提高重组蛋白GFP的产量。
关键发现：磷酸盐限制（葡萄糖为碳源）使GFP产量提高1.87倍（荧光值从12,656 U增至23,644 U） 等 4 条
核心问题：肺炎克雷伯氏菌在1,3-丙二醇发酵过程中产生大量荚膜多糖（CPS），导致发酵液过滤堵塞，严重影响下游分离纯化，需要构建CPS缺陷突变株以解决该问题。
关键发现：突变株发酵液黏度降低27.45%（从1.78降至1.29 mPa·s） 等 5 条
核心问题：如何在酿酒酵母中高效生产香叶基香叶醇（GGOH），并避免传统方法因鲨烯合酶缺陷需补充甾醇或导致生长抑制的问题。
关键发现：过表达BTS1-ERG20融合基因使GGOH产量比单独BTS1提高8倍 等 5 条
核心问题：CYP109B1是一种具有工业应用潜力的P450单加氧酶，但此前缺乏对其底物谱、电子传递伙伴和氧化特性的系统研究。本文旨在通过体外重构和底物筛查，全面表征该酶的底物选择性、电子传递需求及其区域选择性氧化能力。
关键发现：CYP109B1表达产量为3570 nmol/L（160 mg/L） 等 8 条
核心问题：阐明丙酮丁醇梭菌(Clostridium acetobutylicum)从产酸代谢向产溶剂代谢转换的调控机制，并在稳定可控的恒化培养条件下系统比较产酸与产溶剂稳态细胞的蛋白质组和转录组差异。
关键发现：通过磷酸盐限制恒化培养，在pH 等 3 条
核心问题：解析Bacillus methanolicus中丙酮酸羧化酶(PC)和高丝氨酸脱氢酶(HD)（hom-1和hom-2）在从甲醇生产L-赖氨酸过程中的作用，评估它们是否是L-赖氨酸过量生产的关键瓶颈。
关键发现：野生型MGA3在优化补料分批发酵中分泌0.4 g/L L-赖氨酸和59 g/L L-谷氨酸 等 8 条
核心问题：酿酒酵母在高浓度乙醇特别是高重力/超高重力发酵条件下对乙醇敏感，乙醇耐受性涉及基因组水平的复杂互作网络，但其机制尚未完全阐明。
关键发现：乙醇耐受突变株K11和SR4-3可耐受约20%乙醇 等 10 条
核心问题：无环单萜类化合物（如香茅醇）在假单胞菌中的分解代谢途径尚不完全清楚，其甲基支链结构导致生物降解困难，需阐明其代谢机制及生物转化潜力。
关键发现：一分子香茅醇（C10）经Atu和Liu途径最终生成6分子乙酰-CoA 等 2 条