核心问题：从 Streptomyces peucetius 中鉴定并功能表征一个推测的角鲨烯-藿烯环化酶基因 spterp25，验证其编码蛋白是否能够催化角鲨烯环化生成藿烯，从而参与hopanoid生物合成。
关键发现：克隆的 spterp25 基因长 2025 bp，编码 674 个氨基酸；重组蛋白经 SDS-PAGE 表观分子量约 92 kDa；酶活性最适温度为 35-45°C，最适 pH 为 等 3 条
核心问题：如何在不使用共底物（如甘油）的情况下提高热带假丝酵母的木糖醇产量，通过削弱胞内木糖醇脱氢酶（XDH）活性来减少木糖醇的进一步代谢。
关键发现：野生型XDH对NAD+和NADP+的比活分别为3.5和0.025 U/mg 等 2 条
核心问题：克隆并表征肺炎克雷伯氏菌XJ-Li的meso-2,3-丁二醇脱氢酶，揭示其酶学特性，为其在2,3-丁二醇生物合成及手性化合物合成中的应用提供基础。
关键发现：重组meso-2,3-丁二醇脱氢酶经纯化复性后，还原乙偶姻活性为218 U/mg，氧化meso-2,3-丁二醇活性为66 U/mg 等 4 条
核心问题：三孢布拉霉中两个关键类胡萝卜素合成基因（ipi和carG）的全长cDNA未知，且其在异源宿主中的功能及对β-胡萝卜素产量提升的作用有待验证。
关键发现：克隆获得ipi（ORF 624 bp，编码207 aa，24.1 kDa）和carG（ORF 963 bp，编码320 aa，36.6 kDa）全长cDNA 等 5 条
核心问题：利用重组β-葡萄糖苷酶高效转化主要人参皂苷Re和Rg1为稀有人参皂苷Rg2和Rh1，克服传统酶选择性和产率低的问题。
关键发现：bgp1基因全长为2496 bp，编码831个氨基酸，属于糖苷水解酶家族3 等 5 条
核心问题：大肠杆菌内源FPP供给不足，导致木香烃内酯无法有效合成；需要重构其生物合成途径并增强前体供应，同时优化培养条件以提高产量。
关键发现：在大肠杆菌中重构了木香烃内酯生物合成途径，共表达3个合成基因和8个MVA途径基因。在M9Y5培养基、20°C诱导条件下，产量达到90 mg/L 等 2 条
核心问题：从新种Deinococcus wulumuqiensis R12中鉴定推定的类胡萝卜素合成基因，并通过优化Shine-Dalgarno（SD）区域和培养条件，提高大肠杆菌中番茄红素的产量。
关键发现：重组菌EDW11在2×YT+G培养基中、30°C、40h、无IPTG诱导条件下，番茄红素产量达到88 mg/g DCW（780 mg/L），较未优化SD区域的EDW菌株（49 mg/g DCW，417 mg/L）分别提高79%和87% 等 4 条
核心问题：在大肠杆菌中重建达玛烯二醇-II（dammarenediol-II）的异源生物合成途径，以获取达玛烷型四环人参皂苷的前体。
关键发现：通过共表达截短N端26个氨基酸的酿酒酵母角鲨烯合酶（ScERG9）、甲基球菌角鲨烯环氧化酶（McSE）以及拟南芥或酿酒酵母的CPR，成功在大肠杆菌OSQ8和OSQ9菌株中检测到2,3-氧化鲨烯，而酿酒酵母SE的两种截短形式t1ScERG1和t2ScERG1与CPR组合均未产生2,3-氧化鲨烯。... 等 2 条
核心问题：将人参皂苷Gypenoside XVII高效生物转化为高活性稀有人参皂苷Compound K，需要特异性水解糖基的酶。
关键发现：bgy1基因长2283 bp，编码761个氨基酸；重组Bgy1最适pH 等 3 条
核心问题：从Meyerozyma guilliermondii中发现并表征一种新型烯还原酶（MgER），解决现有烯还原酶活性低、底物耐受性差、立体选择性不足等问题，实现α,β-不饱和化合物的高效不对称还原。
关键发现：MgER与OYE2.6氨基酸一致性57% 等 8 条
核心问题：从土壤宏基因组中发掘新型酮还原酶（KRED），用于不对称还原前手性羰基化合物以制备光学活性醇，解决现有酮还原酶对映选择性和催化效率不足的问题。
关键发现：三个酮还原酶（KRED424、KRED432、KRED433）最适温度为55°C，最适pH为7 等 10 条
核心问题：木质纤维素水解物中的糠醛抑制酵母乙醇发酵，现有生物还原法速度慢，需要高效去除糠醛的方法。
关键发现：C. necator JMP134在50°C、OD600=1.0时14分钟内将17 mM糠醛还原至<3 mM 等 4 条
核心问题：从红豆杉（Taxus x media）中克隆紫杉醇生物合成关键酶10-脱乙酰巴卡亭III-10-O-乙酰转移酶（TmDBAT）基因，并通过异源表达验证其功能，揭示其组织表达和诱导表达特征，为紫杉醇生物合成调控提供分子基础。
关键发现：TmDBAT cDNA全长含1323 bp开放阅读框，编码440个氨基酸，预测分子量48,978 Da（pI 等 3 条
核心问题：银杏中倍半萜生物合成酶缺乏鉴定，需要克隆并功能表征参与倍半萜合成的关键酶。
关键发现：GbTPS1以FPP为底物生成(E,E)-farnesol，Km=142.9 μM，kcat=0.004 s^-1 等 6 条
核心问题：利用廉价甘油为碳源，通过重组大肠杆菌生产L-苯丙氨酸，解决底物甘油摄取不足和产物L-苯丙氨酸外排受限导致产量低的问题。
关键发现：在甘油培养基中，pPY和pPYF克隆的最大L-苯丙氨酸产生速率分别为2.3和2.9 mg/L·h，比pPheDH克隆（1.6 mg/L·h）提高1.4倍和1.8倍（P<0.0005） 等 3 条
核心问题：优化重组大肠杆菌BP41Y3生产1,3-丙二醇的环境和营养条件，并评估两相发酵系统中pH控制对以粗甘油为唯一碳源时1,3-丙二醇生产的影响。
关键发现：最佳环境条件为初始pH 等 3 条
核心问题：单萜类化合物对微生物的毒性以及化学羟基化难以实现区域和立体选择性，导致(1R)-6β-羟基-1,8-桉叶素等高价值单萜衍生物难以经济生产。
关键发现：['在10 mM 1,8-桉叶素下，E. coli JM109生长明显受抑，而P. putida GS1和KT2440生长几乎不受影响 等 6 条
核心问题：高效表达具有活性的抗紫杉醇单链抗体（scFv），以克服大肠杆菌系统中包涵体复性效率低的问题，并用于紫杉醇的免疫分析和毒性中和评价。
关键发现：在大肠杆菌系统中，PT-scFv3A3以包涵体形式表达，从1 L培养物纯化得到18.2 mg变性蛋白，复性后从1 mg变性蛋白仅获得758.6 μg蛋白，且活性极低（iELISA几乎无结合）。在家蚕BmNPV bacmid系统中，每只B. mori幼虫可分泌表达并纯化约240 μg活性PT-s... 等 2 条
核心问题：表征重组广藿香醇合酶变体（PTS var.1）的酶学特性，包括产物谱、最适反应条件、动力学参数和底物范围，以评估其作为体外生物催化剂生产萜烯的潜力。
关键发现：PTS var.1的最适pH为7.25，最适温度为38°C；在pH 等 3 条
核心问题：缺乏能够高效对映选择性水解 dl-薄荷醇苯甲酸酯生成 l-薄荷醇的新型酯酶，需要从自然界发掘并表征新的酶催化剂。
关键发现：克隆到的 abmbh 基因长 1080 bp，编码 360 个氨基酸，理论分子量 等 11 条