核心问题：香叶醇水溶性低、易挥发且有毒性，导致全细胞催化生产香叶基葡萄糖苷的产量和转化率低。
关键发现：高细胞密度培养获得干重67.6±1.2 g/L和酶浓度2.7±0.1 g蛋白/L 等 4 条
核心问题：解析地衣芽孢杆菌WX-02中乙酰乳酸合酶(AlsS)的酶学特性，并阐明其在乙偶姻/2,3-丁二醇和L-缬氨酸生物合成中的功能，以通过增强乙酰乳酸供应提高目标产物产量。
关键发现：AlsS对丙酮酸的Km为3.96 mM，kcat为514/s，比活为35.4 U/mg 等 3 条
核心问题：阐明膜结合非血红素双铁酶二甲苯单加氧酶（XylM）催化烃羟化的反应机制，特别是确认是否存在碳中心自由基中间体及其寿命。
关键发现：XylM羟化降蒈烷生成环闭合与开环产物，约2-4%的降蒈烷被代谢 等 6 条
核心问题：实现超嗜热古菌 Thermococcus strain ES1 含铁乙醇脱氢酶（ADH）的克隆、异源表达与全面表征，以解决此类热稳定酶难以获得活性重组形式的问题，并为生物技术应用提供基础。
关键发现：成功在大肠杆菌中异源表达了来自超嗜热古菌 Thermococcus strain ES1 的含铁乙醇脱氢酶（ADH）。重组酶比活为 105±2 U/mg，与天然酶（110±3 U/mg）几乎一致；两者均为同源四聚体，亚基分子量约45±1 kDa；重组酶含铁 等 3 条
核心问题：在大肠杆菌中异源表达植物谷胱甘肽还原酶（BrGR），考察其是否通过调节抗氧化蛋白来增强细胞氧化还原稳态和抵抗氧化应激的能力。
关键发现：BrGR ORF为1509 bp，编码502个氨基酸，预测分子量约54 kDa 等 3 条
核心问题：提高超嗜热古菌 Pyrococcus furiosus 醇脱氢酶 AdhA 在低温（30°C）下对 2,5-己二酮的活性，同时保持其热稳定性，以实现 (2S,5S)-己二醇的工业化生产。
关键发现：野生型 AdhA 在 30°C 的活性不超过最适活性（90°C）的 5%；经一轮易错 PCR 构建约 1,500 个突变株，筛选得到最佳突变体 13F2，其在 30°C 对 2,5-己二酮的最大比活为 等 8 条
核心问题：克隆并鉴定藤仓赤霉（Fusarium fujikuroi）的角鲨烯合酶基因，解析其序列特征和酶活性，为调控异戊二烯代谢奠定基础。
关键发现：克隆的GfSQS基因组DNA长3267 bp，含4个外显子和3个内含子 等 5 条
核心问题：开发一种利用类胡萝卜素裂解双加氧酶（CCD）选择性氧化裂解β-胡萝卜素、生产天然β-紫罗兰酮并进行原位分离的工艺，以解决底物疏水性、产物抑制以及副产物多等问题。
关键发现：POMS/PEI膜对β-紫罗兰酮富集因子为770，远高于2420G/V-1（19）和2421G/V-2（43） 等 6 条
核心问题：如何高效、选择性地将主要人参皂苷Rb2转化为具有更强药理活性的稀有皂苷化合物Y和化合物K，同时克服已知酶选择性低和酶分子未知的问题。
关键发现：bgp3基因长2271 bp，编码756个氨基酸，属于糖基水解酶家族3。重组Bgp3（0.1 mg/ml酶，20 mM磷酸钠缓冲液pH 7.0，40°C）反应12 h，可使0.74 mg/ml的Rb2转化为0.27 mg/ml化合物Y和0.1 mg/ml化合物K。产物经ESI-MS确认：化合物...
核心问题：在粘质沙雷氏菌H30中，meso-2,3-丁二醇脱氢酶（budC编码）的失活并未完全消除2,3-丁二醇的生成，说明存在其他类似酶参与该过程。本研究旨在鉴定并表征参与2,3-丁二醇形成的甘油脱氢酶（GDH），以解释这一现象。
关键发现：gldA基因ORF长1101 bp，编码366个氨基酸，与S. marcescens Db11同源性95%（氨基酸97%）。粗酶液比活力10.48 U/mg，纯化后为20.75 U/mg，纯化倍数1.98。最适pH：还原(3S/3R)-乙酰乳酸和氧化meso-2,3-丁二醇及甘油为pH 等 3 条
核心问题：如何高效、选择性地将大宗人参皂苷Rb1转化为药理活性更高的稀有皂苷20(S)-Rg3，现有微生物转化方法存在选择性差、底物浓度低、产物不纯等问题。
关键发现：重组β-葡萄糖苷酶Tpebgl3在LB培养基中活性约21 U/mL 等 8 条
核心问题：如何在大肠杆菌中实现C4和C5支链醇（异丁醇和3-甲基-1-丁醇）的高效生物合成，并探究关键酶的性质和发酵条件的影响。
关键发现：重组菌株在LB培养基中3-甲基-1-丁醇产量为104 mg/L，异丁醇为24 mg/L 等 3 条
核心问题：提高嗜碱芽孢杆菌Bacillus sp. N16-5碱性β-甘露聚糖酶在大肠杆菌中的胞外表达水平，解决低产量和分泌效率不足的问题。
关键发现：截短酶32a-ManAR2和22b-ManAR2的分泌率分别为59.8%和55.7%，较各自全长酶提高1.2倍 等 3 条
核心问题：从喜树（Camptotheca acuminata）中克隆并功能鉴定香叶醇合酶基因，并在大肠杆菌中异源高效生产香叶醇，同时为解析喜树碱生物合成途径提供基础。
关键发现：CaGES全长cDNA为1906 bp，ORF 1785 bp，编码594个氨基酸 等 4 条
核心问题：从喜树中克隆同源二聚体香叶基二磷酸合酶（CaGPPS）基因，并通过基因拷贝数优化和发酵条件优化提高大肠杆菌中香叶醇的产量。
关键发现：初始重组菌产香叶醇24.0±1.3 mg/L 等 4 条
核心问题：如何获得一种高特异性酶，将主要人参皂苷Rc高效转化为稀有人参皂苷Rd，避免非特异性水解。
关键发现：基因abf22-3长1527 bp，编码蛋白预测分子量58,486 Da；最适pH 等 3 条
核心问题：稀有人参皂苷20(S)-Rg3在天然人参中含量极低而难以获得，需要开发高选择性、高效率的酶法转化方法，以从主要人参皂苷Rb2制备20(S)-Rg3。
关键发现：bgp2基因长度为2430 bp，编码809个氨基酸 等 2 条
核心问题：在E. coli中功能表达海洋细菌Paracoccus haeundaensis的虾青素生物合成基因，并纯化表征各酶。
关键发现：基因大小：crtW 726 bp、crtZ 486 bp、crtY 1158 bp、crtI 1503 bp、crtB 912 bp、crtE 879 bp 等 6 条
核心问题：重组大肠杆菌全细胞生物催化剂中，P450cam多组分单加氧酶系统因电子传递蛋白putidaredoxin（Pdx）不稳定而导致催化活性受限、反应提前达到平台期。
关键发现：使用C73S/C85S-Pdx突变体时，每mg干细胞在4°C、50mM Tris/HCl(pH 7.4)缓冲液中可羟基化约0.7 μmol樟脑，底物转化率较野生型Pdx提高约2倍 等 3 条
核心问题：人β-胡萝卜素15,15'-单加氧酶（BCMO）天然活性不足以满足工业化生产视网膜的需求，需要提高其酶活性。
关键发现：T381L突变体对β-胡萝卜素的催化效率（Vmax/Km）比野生型高1.5倍 等 3 条