核心问题：阐明Zymomonas mobilis高乙醇产量呼吸缺陷突变株的呼吸链缺陷类型及其对好氧生长、乙醇生产和耐热性的影响。
关键发现：RDM-4、RDM-5、RDM-8、RDM-9、RDM-11等NADH脱氢酶缺陷株在好氧条件下表现出更高的生长和乙醇产量，其中RDM-9的酒精脱氢酶活性较野生型提高70倍。ndh基因突变包括G541A（Gly181Ser）、T857C（Leu286Pro）、391-1057缺失及GAAGA插入... 等 2 条
核心问题：目前视黄酸仅通过化学合成生产，缺乏有效的生物催化路线，且尚未发现可将视黄醛转化为视黄酸的细菌乙醛脱氢酶。
关键发现：BcALDH氧化视黄醛的Km为7 μM，kcat/Km为40 mM⁻¹min⁻¹ 等 5 条
核心问题：传统基于序列相似性发现萜烯合酶基因的方法局限于植物来源，缺乏适用于微生物的通用筛选方法，难以发现非植物、序列不保守的萜烯合酶基因。
关键发现：混合培养实验中，表达ADS的细胞在10 mM甲羟戊酸条件下8.5小时内从50%富集至约96%（约4.5倍富集），而对照菌落数由600±40降至21±2 等 3 条
核心问题：红球菌RHA1中蜡酯从头合成的关键酶不明确，且蜡酯产量低；需要鉴定参与蜡酯合成的脂肪酸酰基-CoA还原酶并验证其作用，以提高蜡酯产量。
关键发现：野生型RHA1在指数期（碳限制培养基）积累蜡酯2.2±0.2 μg/g CDW，氮限制条件下为0.6±0.2 μg/g CDW 等 3 条
核心问题：稀有皂苷 (S)-Rh1 和 (S)-Rg2 在天然人参中含量极低（低于干重的0.034%），现有物理化学方法产率低、产物为立体异构混合物且难分离，缺乏高效、可规模化的生物转化方法，制约其药理研究和商业化应用。
关键发现：bglQM 全长 2346 bp，编码 781 个氨基酸残基，预测分子量 等 11 条
核心问题：研究氮素可利用性对野生型藤仓镰孢霉(Fusarium fujikuroi)及其类胡萝卜素超量生产突变体(carS)中类胡萝卜素生成、赤霉素和比卡维林生物合成的调控作用，并探讨CarS突变对氮调控的次级代谢网络的影响。
关键发现：低氮培养基中野生型菌株15天类胡萝卜素产量为48 μg/g，而高氮中为10 μg/g，表明高氮抑制类胡萝卜素合成；carS突变体在低氮中的类胡萝卜素含量约为高氮的5倍。 等 7 条
核心问题：在大肠杆菌异丁醇生物合成中，2-酮酸脱羧酶（Kdc）通常被认为必不可少，但研究发现不含Kdc的菌株仍能产异丁醇，需要阐明其机制并鉴定替代酶。
关键发现：原始含Kdc途径的大肠杆菌菌株24小时产6.8 g/L异丁醇，112小时超过20 g/L。仅过表达alsS、ilvC和ilvD（无kdc）的菌株仍产生异丁醇，其中单独过表达alsS即可产生异丁醇，而单独过表达ilvC和ilvD不产生 等 4 条
核心问题：工业生物催化中缺乏能够高对映选择性还原前手性酮（特别是氟代酮类）以制备手性醇的酶，现有工业酶如Lactobacillus brevis来源的醇脱氢酶对全氟代苯乙酮的对映选择性不足（43.3% S）。
关键发现：鉴定的酮还原酶（KR）为同源四聚体，单体分子量25.5 kDa 等 7 条
核心问题：解析柠檬烯对大肠杆菌产生急性毒性的分子机制，并寻找可缓解毒性的遗传改造靶点。
关键发现：FM003突变株可在含高达5% v/v柠檬烯的液体培养基中生长 等 9 条
核心问题：热应激如何通过胞质Ca2+信号调控灵芝的菌丝生长、菌丝分支、灵芝酸生物合成和热休克蛋白表达。
关键发现：热应激（42°C）抑制灵芝菌丝生长：60、90、120 min处理使菌丝生长速率分别降低35%、50%、55% 等 5 条
核心问题：如何在葡萄酒发酵中通过调整海藻糖代谢来降低乙醇产量，同时避免发酵停滞和不良副产物积累
关键发现：通过筛选66株EUROSCARF缺失突变体，鉴定出5个与乙醇产量显著相关的基因：TPS1、TDH3、ZWF1、ACO1和ACO2。其中tps1Δ和tdh3Δ乙醇产量降低，zwf1Δ、aco1Δ和aco2Δ乙醇产量升高。在工业菌株VIN13中，利用DUT1启动子驱动TPS1表达在指数期比野生型高... 等 3 条
核心问题：从异戊烯基二磷酸（IPP）出发构建合成途径生产三种五碳醇（3-甲基-3-丁烯醇、3-甲基-2-丁烯醇和3-甲基丁醇），需要发现能够催化新反应（IPP/DMAPP去磷酸化、3-甲基-2-丁烯醇还原）的酶，并解决与内源途径竞争共同底物IPP和DMAPP的问题。
关键发现：从36个候选酶（23个HAD样磷酸酶和13个Nudix水解酶）中筛选出7个酶（HAD4、HAD10、NudB、NudF、NudI、NudJ、NudM）能催化IPP去磷酸化产生3-甲基-3-丁烯醇 等 7 条
核心问题：谷氨酸棒状杆菌中常规IPTG诱导系统存在诱导性差、表达异质性等缺点，限制了有毒化合物(+)-瓦伦烯的高效生产；需要建立精确、均一且非侵入性的诱导方法。
关键发现：在BHI培养基中，光诱导在指数中后期明显优于IPTG，最高可达6倍表达量；在CGXII培养基中可达3-4倍。动态范围在CGXII中为239倍（clPTG）对比46倍（IPTG）。单细胞分析表明光诱导产生均一表达，而IPTG诱导产生异质性。通过光笼IPTG诱导结合dxs、idi过表达和密码子优化... 等 4 条
核心问题：在严格甲烷氧化菌Methylomonas sp. strain 16a中，如何鉴定支持外源基因高表达的染色体位点，以实现C40类胡萝卜素（角黄素和虾青素）的高效、稳定合成，同时消除对抗生素抗性标记的依赖。
关键发现：通过无启动子转座子筛选，在Methylomonas sp. strain 16a中鉴定出fliCS、hsdM、ccp-3、cysH和nirS五个染色体区域，这些区域能使总类胡萝卜素产量提高10-20倍（与氯霉素启动子对照相比）。最优菌株MCIS1801（Tn334插入fliS）总类胡萝卜素滴度... 等 2 条
核心问题：去除大肠杆菌末端细胞色素氧化酶和奎醇单加氧酶后，菌株无法进行有氧-无氧代谢转换，其代谢和调控机制不清。
关键发现：敲除cydAB、cyoABCD、cbdAB和ygiN后，氧摄取率降至野生型的约1/60（0.21±0.16 vs 16.49±0.67 mmol/g DCW/h） 等 8 条
核心问题：阐明鸟氨酸脱羧酶（ODC）介导的腐胺产生如何通过调控活性氧（ROS）影响灵芝酸（GA）的生物合成
关键发现：['ODC沉默菌株ODCi3和ODCi4的ODC转录水平分别下降88%和94%，腐胺含量分别下降约67%和79%', '外源8 mM H2O2和3.5 mM KO2处理后，ODC转录水平分别增加1.3倍和3.4倍 等 4 条
核心问题：角鲨烯是工业上重要的化合物，传统来源（鲨鱼肝油、植物）存在污染物、纯化困难、供应不稳定等问题，急需开发可持续的微生物生产方法。
关键发现：单独表达hopA或hopB可在大肠杆菌中检测到角鲨烯 等 3 条
核心问题：拉格酵母的AGT1基因因含有一个提前终止密码子而无法编码功能性麦芽糖/麦芽三糖转运蛋白，导致高浓度（VHG）麦汁发酵缓慢、不完全，残留麦芽糖尤其是麦芽三糖含量高。
关键发现：修复AGT1并组成型表达后，葡萄糖生长细胞的麦芽糖转运活性从1.6 U/g干酵母提高到5.1-10.3 U/g干酵母 等 2 条
核心问题：拟除虫菊酯农药在环境中残留造成生态与健康风险，需要获得能够高效、广谱降解此类污染物的新型酯酶。
关键发现：从Sphingobium sp. JZ-1克隆到840 bp的酯酶基因pyTH，编码280个氨基酸；PyTH与α/β水解酶折叠蛋白同源性为20-24%，含Ser78、Asp202、His230催化三联体和GHSLG保守序列。重组PyTH为单体，分子量约31 kDa，pI 等 4 条
核心问题：如何利用能天然发酵木糖的酵母Pichia stipitis实现从木糖及木质纤维素混合糖高效生产L-乳酸，以降低乳酸生产成本并充分利用可再生原料中的五碳糖。
关键发现：在含101 g/L木糖的CaCO3缓冲YNB培养基中，P. stipitis ldhL菌株产生58 g/L乳酸，得率0.58 g/g 等 5 条