核心问题：研究在谷氨酸棒杆菌中扩增苏氨酸生物合成基因对碳流分配的影响，明确苏氨酸合成途径中的限速步骤，并构建基因工程苏氨酸生产菌株。
关键发现：所有重组菌株的高丝氨酸脱氢酶（HDH）、高丝氨酸激酶（HK）和苏氨酸合酶（TS）比活力分别提高8-12倍、15-25倍和8-12倍 等 8 条
核心问题：评估pta（磷酸转乙酰酶）阴性突变的大肠杆菌HB101作为外源脂肪酶生产宿主的潜力，解决乙酸积累导致的生长抑制和重组蛋白产量下降问题。
关键发现：以葡萄糖、甘露糖、甘油为碳源时，pta突变株PN101最大比生长速率较亲本HB101分别降低约30%（0.90→0.64 h⁻¹，0.98→0.69 h⁻¹，0.82→0.57 h⁻¹） 等 2 条
核心问题：在酿酒酵母中高效表达和分泌黑曲霉RH5344内切多聚半乳糖醛酸酶，提高重组酶的产量和稳定性。
关键发现：缩短ADHI启动子使PG产量从1200 U/ml提高到3000 U/ml（2.5倍） 等 5 条
核心问题：克隆甲醇利用细菌Mycobacterium vaccae N10的甲酸脱氢酶（FDH）基因，并通过定点突变揭示其热稳定性低于Pseudomonas sp. 101 FDH的分子机制。
关键发现：McFDH基因ORF为1200 bp，编码400个氨基酸 等 2 条
核心问题：解析枯草芽孢杆菌menCD启动子响应细胞外pH的调控机制，理解甲基萘醌生物合成基因在环境酸化和孢子形成过程中的表达调控。
关键发现：在含0.1%葡萄糖的未缓冲2×NS培养基中，野生型menCD启动子活性（β-半乳糖苷酶报告）在指数生长结束后约0.5小时（T0.5）达到峰值，至T4.0时降至最大活性的<10%；培养基pH在T0.25降至5.7，随后回升至7.0。在citK、citB、sdhC等TCA循环突变株中，pH持续保持... 等 5 条
核心问题：甘露醇脱氢酶（MDH）在生物技术应用（酶法测定、生物传感器、酶法合成）中需要大量供应，但野生型Rhodobacter sphaeroides Si4的酶产量较低，难以满足应用需求。
关键发现：重组菌株R. sphaeroides Si4[pAK82]的MDH比活为0.48 U/mg，是野生型（0.14 U/mg）的3.4倍 等 2 条
核心问题：能否在酿酒酵母中异源表达古菌膜蛋白细菌视蛋白（bacterio-opsin），并研究其膜定位、N端加工及功能性色素形成能力。
关键发现：['bop基因（前体形式和成熟形式）均能在酿酒酵母中转录和翻译，转录本约1100 nt。', 'BO蛋白在膜部分富集，定位于蔗糖梯度39-41%处，与质膜标记H+-ATPase共分离，细胞质中无BO。', '前体形式BO在AH22菌株中被加工为与天然成熟BO大小相同的蛋白，加工效率在最小培养基... 等 2 条
核心问题：野生型Streptomyces setonii ISP5395不产生类胡萝卜素，但其基因组中存在潜在的类胡萝卜素生物合成基因，如何激活这些隐晦基因以恢复类胡萝卜素合成能力。
关键发现：类胡萝卜素产生突变体在原生质体再生后以10⁻⁴至10⁻⁵频率获得 等 3 条
核心问题：解决木质纤维素生产乙醇中纤维二糖积累抑制纤维素酶的问题，需要获得高产β-葡萄糖苷酶且能发酵纤维二糖的酵母菌株，但重组酵母虽表达高酶活却无法厌氧发酵纤维二糖，需阐明其原因。
关键发现：在重组酵母TYKF2中，以纤维二糖5 g/L和50 g/L培养时β-葡萄糖苷酶活分别为5.8和6.9 I.U.，而供体菌K. fragilis Y610仅为0.025和0.051 I.U. 等 4 条
核心问题：如何通过基因操作获得稳定积累角鲨烯的酿酒酵母菌株，以替代从深海鲨鱼肝脏提取角鲨烯的有限天然资源。
关键发现：获得两个稳定积累角鲨烯的突变株E13和E16，在需氧培养并补充麦角固醇的条件下，两株菌的角鲨烯积累量均达到约5 mg/g干重 等 3 条
核心问题：探索利用嗜盐古菌（Halobacterium salinarum）中细菌视紫红质的高效表达机制，实现人β2-肾上腺素能受体的异源表达，以评估古菌作为真核膜蛋白表达宿主的可行性。
关键发现：在H. salinarum中，β2-AR mRNA约为BO mRNA的1/8（8±2倍差异） 等 3 条
核心问题：工业酿酒酵母无法利用木糖，需要将木糖代谢途径引入工业菌株，以利用木质纤维素原料中的戊糖生产燃料乙醇，并比较实验室与工业背景菌株的发酵性能和胞内代谢物差异。
关键发现：构建的工业重组菌株A4和A6最大比生长速率分别为0.27和0.30 h^-1，亲本A为0.32 h^-1，实验室菌株TMB 3001为0.26 h^-1 等 4 条
核心问题：柠檬烯的区域选择性氧化生物转化，以获得高价值的含氧单萜衍生物（如香芹酮、薄荷醇、紫苏醇等），并解决化学氧化区域选择性差的问题。
关键发现：Rhodococcus opacus PWD4利用甲苯双加氧酶将D-柠檬烯转化为trans-carveol，比活高达15 U/g干重，且无区域异构体 等 10 条
核心问题：总结氧化发酵领域的新进展，包括新型膜结合脱氢酶（醌蛋白和黄素蛋白）的鉴定及其在D-葡萄糖酸、D-山梨醇、奎尼酸等底物氧化中的应用，以及耐热醋酸菌在高温发酵中的优势。
关键发现：FAD-SLDH分子量130 kDa（亚基61/53/17 kDa），比活430 U/mg，Km(D-山梨醇)=30 mM，产物D-果糖 等 2 条
核心问题：如何在非类胡萝卜素产生微生物中实现类胡萝卜素的高效生物合成与结构多样化
关键发现：过表达dxs使番茄红素产量提高2-3倍 等 10 条
核心问题：优化Pseudomonas rhodesiae CIP 107491在双相介质中由α-蒎烯氧化物合成isonovalal的过程，解决细胞膜通透性限制、酶不可逆失活和相转移限制等问题。
关键发现：冷冻细胞结合乙醚透化时，初始反应速率达1280 μmol min⁻¹ g⁻¹ cells 等 6 条
核心问题：赤霉素A1（GA1）在番茄、水稻等作物中生理活性高于GA3，具有重要农业应用潜力，但缺乏能高效生产GA1的微生物菌株和工艺。
关键发现：FKMC1995在SCM中培养12天后总GA达3000 mg/L，其中GA1约1500 mg/L（占50%），为迄今报道的最高GA1产量 等 4 条
核心问题：在毕赤酵母中利用甲醇诱导表达rGuamerin时，溶解氧（DO）与甲醇流加速率（MFR）相互关联，传统独立控制方式难以同步优化，导致产量受限且长期生产不稳定
关键发现：采用双变量DO-stat控制，细胞浓度超过140 g/l，rGuamerin表达水平达到450 IU/l，比传统手动控制甲醇流加的培养高40% 等 4 条
核心问题：研究重组大肠杆菌中影响单环类胡萝卜素torulene生产的关键因素，包括酶表达水平、培养条件和异戊二烯前体途径的改造。
关键发现：高拷贝crtY2使番茄红素完全转化，torulene产量提高至330±19 μg/g-DCW（1.4倍），但β-胡萝卜素副产物增加至132±6 μg/g-DCW（2.8倍），总类胡萝卜素降低20% 等 8 条
核心问题：需氧生长的Shewanella oneidensis MR-1还原转化四氯化碳（CT）的分子机制，尤其是甲萘醌（menaquinone）及其前体1,4-二羟基-2-萘甲酸（DHNA）是否参与该过程。
关键发现：需氧条件下，野生型MR-1的CT转化伪二级速率常数k'=0.219±0.003 ml/(mg protein·h)，menF突变体为0.011±0.001，menB突变体为0.009±0.002，menA突变体为0.216±0.005，menG突变体为0.187±0.004 等 2 条