核心问题：解析并体外重构海洋细菌Streptomyces sp. CNH-189中merochlorin A和B的完整生物合成途径，揭示聚酮-萜烯杂合中间体形成的酶学机制以及氧化氯化/环化反应的催化剂。
关键发现：Mcl17催化丙二酰CoA生成THN (3)的比活力为2.4±0.3 mU/mg（kcat 等 4 条
核心问题：肺炎克雷伯氏菌（Klebsiella pneumoniae）作为工业2,3-丁二醇（2,3-BD）生产菌株，其2,3-BD产量仍有提升空间。本研究旨在通过过表达2,3-BD生物合成途径中的关键酶来增强碳通量、提高2,3-BD产量。
关键发现：KG-rs菌株（同时过表达ALS和AR）在葡萄糖批式发酵中2,3-BD产量比亲本菌株提高12% 等 6 条
核心问题：验证MEP途径是否直接参与阿吗碱生物合成，并通过代谢工程改造MEP途径及下游途径提高长春花毛状根中阿吗碱的产量。
关键发现：过表达STR的转基因毛状根中阿吗碱含量为对照的2.1倍（0.44 mg/g DW vs 0.21 mg/g DW） 等 5 条
核心问题：以酿酒酵母为模式菌株，解析脂质代谢与萜类生物合成的调控机制，并探索通过代谢工程手段提高萜类化合物产量的策略
关键发现：文章报道了具体产量数据：青蒿酸产量达100 mg/L 等 5 条
核心问题：研究茉莉酸甲酯（MJ）和水杨酸（SA）对过表达SmGGPPS的转基因丹参毛状根中丹参酮积累及生物合成基因表达的影响，探索进一步提高丹参酮产量的方法。
关键发现：水对照处理的总丹参酮含量为3.55~4.10 mg/g 等 6 条
核心问题：从枸杞中克隆β-胡萝卜素羟化酶基因（chyb）并验证其功能，以实现玉米黄质在大肠杆菌中的生物合成。
关键发现：克隆获得939 bp的chyb ORF，编码312个氨基酸的蛋白，分子量约34.8 kDa，理论pI为8.36 等 3 条
核心问题：优化重组大肠杆菌在基本培养基中以甘油或葡萄糖为碳源合成(S)-柠檬烯的效率，识别限制产量和生产力的关键参数，包括遗传、生理和反应工程因素。
关键发现：以甘油为碳源的两液相补料分批发酵中，(S)-柠檬烯最终浓度达到2700 mg/L有机相，是葡萄糖（690 mg/L有机相）的3.9倍 等 4 条
核心问题：3-羟基丙酸（3-HP）生物合成中，中间产物3-羟基丙醛（3-HPA）的毒性积累限制了产量和生产率，需要高效乙醛脱氢酶以平衡甘油脱水酶与脱氢酶的活性，减少3-HPA积累。
关键发现：GabD4在37°C、pH 8下对3-HPA的比活为55.5 U/mg，高于E. coli AldH的33.2 U/mg 等 6 条
核心问题：研究大肠杆菌及其pfkA缺失突变体在NADPH依赖性还原性全细胞生物转化中的全球基因表达变化，以及氧供对生物转化效率和代谢状态的影响。
关键发现：厌氧条件下，参考菌株和ΔpfkA突变体的MHB生产速率均为7.4 mmol h^-1 g_cdw^-1 等 3 条
核心问题：在酿酒酵母中优化甲羟戊酸途径代谢通量，以提高萜类化合物（特别是青蒿素前体amorpha-4,11-diene）的产量，并解决传统基因整合方法耗时费力的问题。
关键发现：['获得最佳突变株M3-2nd，其amorpha-4,11-diene产量超过亲本菌株13倍，约为64 mg/L石竹烯当量', '在所有测试的8个类胡萝卜素高产菌株中，amorpha-4,11-diene产量均高于亲本，最好的M7和M8在培养5天后产量为亲本的6倍', 'qPCR分析确认M3-...
核心问题：由于缺乏稳态动力学信息和萜类生物合成通路的深入理解，难以构建高效通用的微生物萜类生产系统。
关键发现：体外重构系统优化后法尼烯产量提高6倍，最大转换率约0.4 s⁻¹。工程菌F1生产130 mg/L法尼烯（比对照F0高400倍） 等 2 条
核心问题：在酿酒酵母中构建可控且遗传稳定的多基因异源生物合成途径，解决重复序列重组和途径开关难以调控的问题。
关键发现：构建了约16 kb的β-胡萝卜素合成途径，各轮整合效率为80%-100% 等 5 条
核心问题：在茉莉酸甲酯（MJ）诱导的红豆杉细胞中，紫杉烷核心官能团修饰（羟基化与酰化）对紫杉醇及其前体生物合成的网络调控机制尚不清楚，尤其是羟基化与酰化步骤的相对重要性未被阐明。
关键发现：MJ诱导后，TAX（紫杉醇类）占总紫杉烷比例从5.4%（1天）升至9.0%（15天），最高达11.4%（12天），而对照组从5.4%降至4.6% 等 3 条
核心问题：实现生淀粉（尤其是木薯淀粉）在高温下的直接乙醇发酵，减少传统工艺中淀粉糊化、液化和糖化的能源与酶成本。
关键发现：在42°C、200 g/L木薯淀粉条件下，YRL 009产生66.52 g/L乙醇 等 7 条
核心问题：发现和表征具有新底物特异性的自足型细胞色素P450单加氧酶，特别是能催化非活化C-H键区域和立体选择性羟基化的酶。
关键发现：通过基因组挖掘发现并鉴定了来自Labrenzia aggregata IAM 12614的自足型P450单加氧酶CYP116B4（P450LAMO），其与P450RHF和P450SMO分别有60%和62%的同源性。纯化后的P450LAMO对p-氯硫代苯甲醚的比活力为7.0 U g^-1，较粗提... 等 8 条
核心问题：传统细菌萜烯环化酶化学表征流程中，限制性酶切连接克隆步骤繁琐且常需多次尝试，成为快速鉴定的瓶颈；因此需要开发一种更高效的克隆与异源表达方法。
关键发现：从 S. espanensis 的萜烯环化酶（accession YP_007039597）被证实为石竹烯合酶，仅以 FPP 为底物生成单一产物石竹烯；从 S. spinosa 的酶（WP_010314578）在顶空分析中主产物为 (E)-β-法尼烯（2），体外孵育主产物为 hedycaryo... 等 4 条
核心问题：探索非天然氨基酸诱变是否能够改善P450氧化催化剂的效率和区域选择性，并实现天然氨基酸突变无法达到的功能变化。
关键发现：构建了44个uP450变体，其中22个表达量为母体的10-95%，另有12个产量为2-15 mg/L。对(S)-布洛芬甲酯(1)，母体139-3生成3/4比例为62:38 等 4 条
核心问题：鉴定两个链霉菌来源的推定异戊烯基转移酶SAML0654和Strvi8510的生化功能，并阐明其底物特异性。
关键发现：SAML0654和Strvi8510被鉴定为6-二甲基烯丙基色氨酸合酶（6-DMATS），二者序列一致性为63%。以L-色氨酸和DMAPP为底物时，SAML0654和Strvi8510的产物产率分别为59.4%和42.2%。L-色氨酸是最佳底物，Km=0.018 mM，kcat=0.30 s⁻... 等 3 条
核心问题：野生型 CmOYE 对中间体 (4S)-phenol 的催化活性低，导致一锅两步还原合成 (4R,6R)-actinol 时中间体积累，产物收率仅 67.2%。
关键发现：CmOYE 与底物类似物 p-HBA 复合物晶体结构分辨率为 等 6 条
核心问题：解析Streptomyces coelicolor A3(2)中C35 bacteriohopanepolyol生物合成途径，鉴定假定的中间体ribosylhopane并确定orf14和orf18基因功能
关键发现：野生型S. coelicolor A3(2)仅产生aminobacteriohopanetrol（5） 等 5 条