Analysis of the Wsi18, a stress-inducible promoter that is active in the whole grain of transgenic rice
核心问题:缺乏在单子叶作物中高效且低背景的胁迫诱导型启动子,尤其需要一种能在全株和种子中受胁迫诱导表达的启动子系统。
关键发现:Wsi18 mRNA在叶片中暴露NaCl或ABA后2小时内、干旱后6小时内显著增加,低温下无响应 等 2 条
核心问题:缺乏在单子叶作物中高效且低背景的胁迫诱导型启动子,尤其需要一种能在全株和种子中受胁迫诱导表达的启动子系统。
关键发现:Wsi18 mRNA在叶片中暴露NaCl或ABA后2小时内、干旱后6小时内显著增加,低温下无响应 等 2 条
核心问题:解析香蕉COR2-like基因上游启动子的组织特异性与胁迫诱导特性,揭示次级代谢(生物碱)基因在逆境下的转录调控机制。
关键发现:MusaCOR2-like的CDS长957 bp,编码318个氨基酸的蛋白,理论pI 5.67,预测分子量约35 kDa 等 5 条
核心问题:高效表达具有活性的抗紫杉醇单链抗体(scFv),以克服大肠杆菌系统中包涵体复性效率低的问题,并用于紫杉醇的免疫分析和毒性中和评价。
关键发现:在大肠杆菌系统中,PT-scFv3A3以包涵体形式表达,从1 L培养物纯化得到18.2 mg变性蛋白,复性后从1 mg变性蛋白仅获得758.6 μg蛋白,且活性极低(iELISA几乎无结合)。在家蚕BmNPV bacmid系统中,每只B. mori幼虫可分泌表达并纯化约240 μg活性PT-s... 等 2 条
核心问题:传统中药植物中生物活性化合物(苯丙素类、萜类、生物碱类)的生物合成途径尚未完全阐明,导致这些高价值天然产物供应不足,难以大规模可持续生产。
关键发现:全球约30万种高等植物中约10%分布于中国 等 3 条
核心问题:探究酵母ABC转运蛋白PDR5在鳞翅目昆虫细胞中异源表达后,是否能够赋予细胞对蛋白质合成抑制剂二乙酰氧基藜芦醇和蜕皮激素激动剂RH5992的耐受性,从而研究昆虫抗药机制。
关键发现:成功建立了稳定表达pdr5的Sf21和CF-203细胞系,RT-PCR和Northern blot检测到pdr5转录本。在diacetoxyscirpenol处理下,pIZ/pdr5-Sf21细胞在6、8、10 ng/ml浓度下存活率分别为76.2%、52%和48.5%,而对照pIZ/V5-H... 等 2 条
核心问题:Naematolin是一种由Hypholoma属产生的具有抗肿瘤、抗病毒等生物活性的倍半萜化合物,但其天然产量低且结构复杂,限制了其开发应用。核心问题在于缺乏其生物合成基因簇的认知,导致无法通过异源生产和组合生物合成获取该化合物及其衍生物。
关键发现:H. fasciculare基因组草图大小为58.84 Mbp,contig N50为49,633;预测到17个倍半萜合酶(SQS),其中Hfas94a和Hfas94b异源表达主要产生α-蒎烯(Rt 等 7 条
核心问题:利用蓝细菌作为光合自养底盘,直接从太阳能、CO2和水生产燃料和化学品,以替代作物基生物燃料,缓解能源安全和气候变化问题。
关键发现:2008年全球能耗约13 TW,约80%来自化石燃料,年CO2排放约6 Gt 等 5 条
核心问题:虎奶菇(Lignosus rhinocerus)作为传统药用真菌,其次生代谢产物研究不足,且野生资源稀缺。需要从基因组中挖掘未表征的倍半萜合酶基因,通过功能表征揭示其产物结构,以理解其生物活性的化学基础。
关键发现:虎奶菇TM02基因组大小为34.3 Mb,编码10,742个推定基因 等 3 条
核心问题:如何利用合成生物学方法设计和构建光合蓝藻微生物细胞工厂,将太阳能直接转化为可再生太阳燃料(如氢气、醇类、异戊二烯),并克服现有方法的瓶颈。
关键发现:在Synechococcus elongatus PCC 7942中异源表达Clostridium acetobutylicum的[FeFe]氢化酶HydA及成熟酶,厌氧条件下光驱动产氢量比内源[NiFe]氢化酶提高>500倍 等 4 条
核心问题:首次鉴定出一个以法尼基二磷酸为底物主要产生δ-cadinol的倍半萜合酶,该酶可能参与担子菌Boreostereum vibrans中boreovibrins的生物合成;此前尚无主要形成δ-cadinol的合酶报道。
关键发现:克隆的BvCS基因开放阅读框长1182 bp 等 3 条
核心问题:利用在大肠杆菌中异源表达的类胡萝卜素基因,评估类胡萝卜素对近紫外激活的光毒分子所造成损伤的保护作用,并区分其作用靶标与机制。
关键发现:从Erwinia herbicola克隆的15.6 kb DNA片段使E. coli LE392(pPL376)产生八氢番茄红素、β-胡萝卜素、β-隐黄质、玉米黄质及其糖苷 等 7 条
核心问题:解决 Ti 质粒 T-DNA 作为植物基因载体时致瘤基因阻碍转化细胞再生完整植株的问题,并实现外源基因及完整 T-DNA 稳定传递给后代。
关键发现:HADH2 克隆中 39/48 (约81%) 为 nopaline 阳性,HADH4 为 2/40,H14a/a 为 2/45 等 6 条
核心问题:确定荚膜红假单胞菌(Rhodopseudomonas capsulata)光合基因簇的遗传-物理图谱,识别参与光合膜分化、细菌叶绿素和类胡萝卜素生物合成的基因及其转录单元。
关键发现:Tn5.7长度为7.6 kb,共分离45个独立插入,其中30个成功重组到染色体上。突变体KZR3H2和KZR8A8(插入位点分别为51.9和50.8 kb)出现30 kb以上缺失。插入26.3定位于rxcA(反应中心M亚基结构基因),导致反应中心缺陷。F1696开放阅读框编码477个氨基酸,插... 等 3 条
核心问题:如何从微生物宿主中高效生产和纯化小麦种子贮藏蛋白α-醇溶蛋白,以支撑其结构与功能研究。
关键发现:通过NSSD G/L培养基,α-gliadin产量达0.5-4 μg/ml培养液,纯化得率约675 μg/L(4 L培养物获2.7 mg) 等 5 条
核心问题:在裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe 中异源表达人胃脂肪酶(hGL),评估其作为生产宿主的能力,为胰腺脂肪酶缺乏症提供酶替代疗法。
关键发现:在裂殖酵母中,hGL cDNA 受 Padh1 或 CaMV 35S 启动子驱动时均有活性脂肪酶分泌,以 Padh1 驱动的细胞壁相关脂肪酶活性最高 等 5 条
核心问题:克隆并表达Bacillus stearothermophilus的D-丙氨酸羧肽酶(dacA)基因,为青霉素结合蛋白(PBP)的结构与功能研究提供足量且性质优良的酶蛋白,并探索适合PBP家族蛋白表达的宿主系统。
关键发现:['dacA基因开放阅读框长1356 nt,编码452个氨基酸,预测分子量49 kDa,含30个氨基酸的信号肽', 'CPase与B. subtilis dacA编码蛋白同源性61%,与E. coli dacA同源性31%,与Streptomyces R61 DD-肽酶同源性19%', '在E... 等 2 条
核心问题:解析多重产物倍半萜合酶δ-selinene synthase与γ-humulene synthase通过两个DDxxD基序等结构元件产生数十种倍半萜烯产物的分子基础,并通过定点突变和截短改变产物形成谱。
关键发现:γ-humulene synthase(γHS)和δ-selinene synthase(δSS)分别产生>50种和>30种倍半萜烯。γHS第一个DDxxD基序第一个天冬氨酸D343突变为丙氨酸(D343A)后,烯烃产物kcat降低>3000倍,无法获得可靠动力学数据 等 2 条
核心问题:鉴定和表征参与platensimycin(PTM)和platencin(PTN)生物合成的新型细菌二萜合酶(DTS),并建立系统的体内外研究方法。
关键发现:ΔptmT3突变完全消除PTM产生但不影响PTN产生 等 3 条
核心问题:青蒿素在黄花蒿中含量低(0.01%-0.8%干重),限制其商业化,需要理解青蒿素生物合成途径的miRNA调控机制。
关键发现:共预测到6个潜在miRNA,属于miR414和miR1310家族 等 6 条
核心问题:非模式植物中香料萜类化合物生物合成基因的发现,特别是檀香中负责(Z)-檀香醇最终合成的P450酶。
关键发现:测序深度约6600万reads/文库,12个文库(每个组织4个生物学重复)用于从头组装 等 5 条