核心问题：在裂殖酵母 Schizosaccharomyces pombe 中缺乏不依赖特定营养缺陷突变、可直接选择的抗性筛选标记，需要开发基于 G418 抗性的转化系统。
关键发现：35S 启动子驱动的 G418 抗性达到 1 mg/ml，与强启动子 adh1 相当 等 6 条
核心问题：解决大肠杆菌克隆载体无法直接应用于Pseudomonas stutzeri的问题，实现高频电转化。
关键发现：pHSG298电穿孔最大转化频率达2×10^7 transformants/μg DNA 等 5 条
核心问题：验证乙酸盐是否为Phycomyces blakesleeanus中类胡萝卜素（特别是β-胡萝卜素）生物合成的直接前体，并定量其碳原子贡献。
关键发现：在乳酸铵+乙酸盐培养基中，类胡萝卜素总量（消光系数）为0.416，而乳酸铵+葡萄糖为1.50，葡萄糖+天冬酰胺为1.78，仅乳酸铵为0 等 3 条
核心问题：如何通过生物工程手段改造植物精油中异戊二烯类次生代谢产物的合成，提高产量或改变组成。
关键发现：异戊二烯类化合物是自然界最大的天然产物家族，超过22,000种。单萜环化酶催化数较低，为0.01–0.3 s^-1 等 3 条
核心问题：研究2-甲基异冰片（2-MIB）生物合成相关Cnb蛋白的功能，尤其是它们在细胞内2-MIB保留中的作用。
关键发现：含cnbA-mtf-mtc-cnbB的大肠杆菌菌株细胞内2-MIB浓度为0.004 μg/ml/OD600，细胞外为0.0018 μg/ml/OD600 等 2 条
核心问题：酿酒酵母不能利用木质纤维素水解物中的木糖和纤维寡糖，导致乙醇发酵效率低下。
关键发现：重组菌株MT8-1/Xyl/BGL在50 g/L木糖发酵中，72 h消耗约47 g/L木糖，产乙醇约18 g/L，乙醇得率0.37 g/g（理论得率的72.5%） 等 4 条
核心问题：肺炎克雷伯氏菌在1,3-丙二醇发酵过程中产生大量荚膜多糖（CPS），导致发酵液过滤堵塞，严重影响下游分离纯化，需要构建CPS缺陷突变株以解决该问题。
关键发现：突变株发酵液黏度降低27.45%（从1.78降至1.29 mPa·s） 等 5 条
核心问题：阐明丙酮丁醇梭菌(Clostridium acetobutylicum)从产酸代谢向产溶剂代谢转换的调控机制，并在稳定可控的恒化培养条件下系统比较产酸与产溶剂稳态细胞的蛋白质组和转录组差异。
关键发现：通过磷酸盐限制恒化培养，在pH 等 3 条
核心问题：酿酒酵母在高浓度乙醇特别是高重力/超高重力发酵条件下对乙醇敏感，乙醇耐受性涉及基因组水平的复杂互作网络，但其机制尚未完全阐明。
关键发现：乙醇耐受突变株K11和SR4-3可耐受约20%乙醇 等 10 条
核心问题：Rhodococcus erythropolis MAK154中氨基酸醇脱氢酶(AADH)表达水平低，限制了其作为生物催化剂生产手性氨基醇（如d-伪麻黄碱）的应用，需要揭示其调控机制并提高表达。
关键发现：在野生型MAK154中，添加1-氨基-2-丙醇诱导后AADH活性可产生约1 mg/ml EPE（产物），而敲除orfE的ΔorfE菌株无论是否诱导均产生约7 mg/ml EPE，AADH活性显著高于诱导的野生型 等 3 条
核心问题：木质纤维素生物质中木质素抑制纤维素酶解和发酵，传统预处理成本高，需开发低成本的木质素降解预处理方法
关键发现：克隆了漆酶I基因（GenBank登录号JF825479），含10个内含子 等 6 条
核心问题：探索蘑菇形成真菌裂褶菌（Schizophyllum commune）作为倍半萜（+）-缬草烯生产平台的潜力，同时解决野生型菌株分泌大量裂褶菌多糖（schizophyllan）导致产物难以分离纯化的问题。
关键发现：野生型菌株H4-8的裂褶菌多糖产量为2.9±0.7 g/L，而thn突变体KS8中该多糖未检测到 等 5 条
核心问题：双歧杆菌作为益生菌需要耐受酸性环境，但其酸耐受性较弱，限制其应用。本研究旨在探索细胞膜与酸耐受性之间的关系，以理解酸耐受机制并开发增强策略。
关键发现：在含Tween 80培养基中，B. longum JDY1017dpH和B. breve BB8dpH的酸耐受性比亲本株高10^4~10^5倍 等 2 条
核心问题：玉米原料乙醇发酵过程中，植酸会降低乙醇生产效率并导致磷排放增加，同时降低DDGS的动物饲料价值。
关键发现：重组菌株PHY表面植酸酶活力达6.4 U/g湿细胞，细胞壁部分为9.2 U/g；摇瓶发酵中PHY菌株乙醇产量112.7 g/L，比对照菌株高5.5%，发酵效率达89.96%（对照85.82%）；5-L生物反应器中，PHY菌株比生长速率提高20.1%（0.53 vs 等 5 条
核心问题：揭示RNA结合蛋白Pub1p在葡萄酒发酵过程中如何通过调控Gpd1p活性来影响甘油产量和酵母胁迫耐受性，并阐明其与TOR1/Sch9营养信号通路在寿命调控中的关系。
关键发现：pub1Δ突变体在第1天细胞内甘油含量比野生型高5倍，且整个发酵期间均维持较高水平 等 6 条
核心问题：Oenococcus oeni在葡萄酒高乙醇浓度下苹果酸乳酸发酵（MLF）易停滞、不可靠的问题
关键发现：连续培养290天，乙醇浓度从0逐步升至15% (v/v)，生长速率从0.10 h⁻¹降至0.05 h⁻¹ 等 6 条
核心问题：稀有人参皂苷Compound K (CK)和F1在食品工业中具有重要应用，但传统重组酶生产存在表达宿主非GRAS、生产率低、酶浓度不足等问题，缺乏安全高效的食品级制备方法。
关键发现：['筛选到10种候选糖苷酶，其中MT619（来自Microbacterium testaceum ATCC 15829）活性最高，其F1生产活性是BgpA的7.4倍', '融合C3a的C3a-MT619在C. glutamicum ATCC13032中表达量占总蛋白的1.41±0.03%，约为... 等 3 条
核心问题：萜类化合物结构多样、应用广泛，但天然提取和化学合成受限于产量、成本与资源浪费，微生物生产作为一种可持续替代途径需要选择并改造合适的底盘宿主。
关键发现：超过70000种萜类结构已知 等 17 条
核心问题：二倍体酵母如Xanthophyllomyces dendrorhous遗传转化后通常产生杂合转化子，由于有丝分裂重组导致遗传不稳定，且基因失活因未完全破坏而呈现中间表型，阻碍工业应用
关键发现：X. dendrorhous野生型虾青素含量约200 μg/g干重 等 5 条
核心问题：如何系统理解并提高Rhodosporidium toruloides生产类胡萝卜素的效率，实现其工业应用
关键发现：R. toruloides在特定条件下胞内脂质积累可超过细胞干重的70%，并同时积累大量类胡萝卜素（主要是torulene、torularhodin、β-胡萝卜素和少量γ-胡萝卜素）。过表达内源ACAT2基因使Rhodosporidium kratochvilovae的类胡萝卜素积累增加50.... 等 3 条