核心问题：揭示细菌中吲哚萜类生物碱（如xiamycin和sespenine）生物合成的分子机制及其独特环化序列
关键发现：异源表达pXU472在S. albus中产生xiamycin A（2，C23H25NO3，m/z 等 6 条
核心问题：青蒿素供应不足且成本高昂，需要开发一种高效、可规模化、低成本的青蒿素合成方法，以替代从植物中提取。
关键发现：光氧化步骤在连续流动条件下，以二氯甲烷为溶剂，TPP为光敏剂，2的转化率为91%，3的收率为75%，每分钟可生产1.5 mmol 3 等 4 条
核心问题：germacrene类十元环倍半萜的合成困难，缺乏可扩展、对映选择性且能大量制备关键中间体的方法；中环化合物对酸热不稳定，导致合成和纯化困难。
关键发现：法尼醇（2）经3步（Sharpless环氧化、氧化、氯代）以63%总产率得到环化前体5（ee=90%） 等 8 条
核心问题：评估工程化酿酒酵母DA24-16（可同时利用纤维二糖和木糖）在同步糖化发酵（SSF）中取代外源β-葡萄糖苷酶的能力，并比较SSF与分步水解发酵（SHF）的工艺性能。
关键发现：DA24-16菌株在SSF中140 h仅实现10%纤维素转化（有木糖时25%），而非CDT菌株补充β-葡萄糖苷酶在90 h达到近100%转化 等 5 条
核心问题：评估四种微生物宿主（Escherichia coli、Saccharomyces cerevisiae、Pichia pastoris和Yarrowia lipolytica）作为全细胞催化剂表达人细胞色素P450 2D6（CYP2D6）及其还原酶（CPR）的性能，以确定最适合生产药物代谢物的系统。
关键发现：P. pastoris菌株5x2D6/1xCPR表达CYP2D6达660 pmol/mg总膜蛋白，为微生物系统最高 等 5 条
核心问题：植物细胞培养中紫杉醇积累的变异性机制不明确，限制了其商业化应用；需要解析紫杉醇生物合成通路基因表达与产量变异之间的关系。
关键发现：MeJA诱导后，紫杉醇通路基因显著上调（1.5-160倍） 等 3 条
核心问题：单萜类化合物对酿酒酵母等微生物具有高毒性，严重制约了微生物法生产单萜基航空燃料。
关键发现：五种单萜对S. cerevisiae的MIC分别为：柠檬烯0.44 mM、松油烯0.53 mM、γ-萜品烯0.70 mM、β-蒎烯1.45 mM、月桂烯2.12 mM 等 3 条
核心问题：开发一种可扩展的方法，在密封的光生物反应器中利用光合微生物从CO2和水可持续地生产和收集异戊二烯，同时解决密封系统导致的CO2耗尽、O2积累和产物挥发物收集问题。
关键发现：野生型和SkIspS转化体的倍增时间均约23小时（20 μmol photons m^-2 s^-1光照下） 等 3 条
核心问题：CYP51（羊毛脂醇14α-脱甲基酶）依赖外部电子传递系统，天然催化效率低，限制了其应用。
关键发现：融合酶CYP51-FprD F1和F2的kcat/Km分别为96.91和105.79 nmol/min/nmol，比单独的CYP51/FprD重构系统高约35倍 等 6 条
核心问题：解析产溶剂梭菌Clostridium carboxidivorans P7在连续通入合成气的生物反应器中，将合成气转化为乙醇和丁醇过程中的生理响应，包括细胞生长、pH变化、产物形成、关键酶活性和基因表达，并探究两个串联乙醛/乙醇脱氢酶基因在溶剂生成中的差异角色。
关键发现：最大产物浓度：乙酸41 mM、丁酸1.4 mM、乙醇61 mM、丁醇7.1 mM 等 12 条
核心问题：在酿酒酵母中构建高效合成丹参酮关键前体militradiene的代谢途径，解决天然提取产量低、化学合成困难的问题。
关键发现：初始整合菌株ZD-T-010在SD培养基中产生4.2 mg/L militradiene（含量4.4 mg/g细胞干重） 等 7 条
核心问题：酿酒酵母中已知组成型启动子数量有限，且缺乏在不同培养条件下并行表征的数据，限制了大型生化途径的构建与优化。
关键发现：14个启动子的GFP平均荧光强度差异不超过6倍，其中TEF1p最强，PGI1p最弱 等 4 条
核心问题：柳枝稷等纤维素生物质水解液含有大量木糖，但酿酒酵母等传统菌株不能有效将木糖转化为乙醇。本研究考察外源固定化木糖异构酶对低细胞密度培养的Saccharomyces pastorianus和Saccharomyces cerevisiae生长及乙醇生产速率的影响，以提升纤维素乙醇的经济可行性。
关键发现：木糖异构酶显著提高S. pastorianus的生长和乙醇生产率：在160 g/L葡萄糖培养中，加酶使最大乙醇浓度提高12%（P≤0.05） 等 5 条
核心问题：砷酸盐污染水体中砷酸盐的去除效率低，缺乏高效、经济的生物修复方法，特别是利用酿酒酵母作为生物吸附剂增强砷酸盐内化的研究尚未开展。
关键发现：在12,000和30,000 ppb砷酸盐缓冲液中，工程菌株特异性摄取量最高达750 μg As/g细胞，比对照提高50% 等 7 条
核心问题：缺乏在线监测系统导致重组蛋白生产在摇瓶筛选过程中信息不完整，无法预测和优化产量。
关键发现：非诱导条件下8个克隆的OTR峰值均为65-75 mmol/L/h 等 5 条
核心问题：在果蝇S2细胞中高效表达具有生物活性的人凝血因子IX，并验证其内源γ-谷氨酰羧化酶能否完成人维生素K依赖蛋白的γ-羧基化修饰。
关键发现：S2细胞分泌hFIX最高达670 ng/mL（第3天），凝血活性最高157 mU/mL 等 7 条
核心问题：揭示GMC超家族成员芳香醇氧化酶(AAO)氧化伯醇时氢负转移的立体选择性机制，并探索其工程改造用于手性芳香醇的去消旋化。
关键发现：(R)-[α-2H]-p-甲氧基苄醇的初级KIE约为6（稳态kcat KIE=5.2，瞬态kred KIE=6.5），而(S)-对映体KIE接近1 等 3 条
核心问题：鉴定参与最丰富的真菌meroterpenoid（来源于3,5-二甲基苔色酸）生物合成的关键异戊烯基转移酶，并揭示其催化的芳香加成反应。
关键发现：从A. terreus基因组中鉴定出36 kb的trt基因簇（13个基因）；Trt4（PKS）在A. oryzae中异源表达产生DMOA (1)，分子式C10H12O4（HRMS [M+H]+ 等 3 条
核心问题：提高枯草杆菌蛋白酶E（Subtilisin E）对离液盐盐酸胍（GdmCl）和去污剂十二烷基硫酸钠（SDS）的耐受性，以满足诊断试剂盒中细胞裂解和DNA提取的应用需求。
关键发现：获得最优变体SeSaM1-5（S62I/A153V/G166S/I205V），在1 M GdmCl中半衰期从<2 min提升至4.7 h（活性提高330%），在0.5% SDS中提升至2.7 h 等 5 条
核心问题：从链霉菌基因组中挖掘并表征新的细菌二萜环化酶，鉴定合成西松烷骨架的酶。
关键发现：从Streptomyces sp. SANK 60404基因组中鉴定出两个新的I类二萜环化酶DtcycA（371 aa）和DtcycB（343 aa），两者均含NSE基序，与CotB2的序列一致性仅14%和19% 等 6 条