Preparation of \(^{14}\)C Gossypol by Incorporation of Acetate-1-14C and Acetate-2-14C by Biosynthesis1
核心问题:如何通过生物合成方法高效制备放射性标记的棉酚,用于后续代谢研究
关键发现:从根组织获得的棉酚平均比活度为428.6×10^3 dpm/mg,掺入率5.42% 等 3 条
核心问题:如何通过生物合成方法高效制备放射性标记的棉酚,用于后续代谢研究
关键发现:从根组织获得的棉酚平均比活度为428.6×10^3 dpm/mg,掺入率5.42% 等 3 条
核心问题:验证顺式异构体橙花基焦磷酸(NPP)是否比反式牻牛儿基焦磷酸(GPP)更有效地作为环状单萜(如α-蒎烯、β-蒎烯)的生物合成前体
关键发现:['以2-14C NPP为底物时,放射性标记的α-蒎烯和β-蒎烯的回收量占加入放射性的0.6% 等 5 条
核心问题:确定 Trichoderma virens 中推测的萜烯环化酶基因 vir4 的功能,验证其是否负责挥发性萜烯化合物的生物合成,并澄清该基因簇真正合成的代谢产物。
关键发现:敲除 vir4 后,T. virens 中 24 个倍半萜全部缺失,回补株仅恢复其中 11 个 等 6 条
核心问题:Nepeta属植物中nepetalactone生物合成相关基因尚未鉴定,iridoid synthase是否决定nepetalactone不同立体异构体的生成尚不明确。
关键发现:N. cataria主要积累cis-trans-nepetalactone,N. mussinii主要积累trans-cis-nepetalactone 等 9 条
核心问题:大麻中四氢大麻酚(THC)生物合成途径中,橄榄醇酸与牻牛儿基焦磷酸(GPP)缩合生成大麻萜酚酸(CBGA)的关键酶尚未被发现和表征。
关键发现:标准条件下产物生成量为9.1 nmol,CBGA/CBNA比例约为2:1 等 9 条
核心问题:验证squalene 2,3-oxide是否为fusidic acid的直接环状前体,从而支持其在多环三萜生物合成中的普遍中间体作用。
关键发现:2 mg的[3H]squalene 2,3-氧化物(6.43×10^6 dpm)加入300 ml培养物,140小时后分离得到160 mg fusidic acid,比活861 dpm/mg 等 5 条
核心问题:阐明头对头萜烯(如角鲨烯和植物烯)生物合成中环丙基甲醇焦磷酸酯的碳正离子重排机制,并理解酶如何控制这一复杂重排的立体化学和区域选择性。
关键发现:水解N-甲基-4-(chrysanthemyloxy)吡啶鎓碘化物生成artemisia triene、santolina triene、yomogi醇、artemisia醇、chrysanthemol等9种产物 等 6 条
核心问题:尽管Streptomyces cinnamonensis DSM 1042的FNQ I和endophenazine A生物合成基因簇中仅含一个甲羟戊酸途径基因(推定甲羟戊酸激酶),但其异戊二烯基部分究竟由甲羟戊酸途径还是MEP途径提供,以及两者的贡献比例问题。
关键发现:在标准生产培养基中,FNQ I产量为8 mg/L,endophenazine A为4 mg/L 等 4 条
核心问题:解析来自海洋放线菌 Salinispora arenicola CNS-205 的孤儿二萜生物合成操纵子 terp1 的功能,确定其编码酶的催化反应及最终产物。
关键发现:SaCPS 与 GGPS 共表达产生 normal CPP,产物经去磷酸化后经 GC-MS 确认为 copalol 等 5 条
核心问题:阐明青蒿素生物合成关键酶amorpha-4,11-diene合酶(ADS)催化法尼基焦磷酸(FPP)环化为amorpha-4,11-diene的分子机制,区分三种可能的闭环途径(bisabolyl碳正离子经1,3-氢迁移、bisabolyl碳正离子经两次1,2-氢迁移、germacryl碳正离...
关键发现:ADS重组蛋白纯度>95%,分子量为61 kDa 等 5 条
核心问题:验证蓝藻是否通过非甲羟戊酸途径(NMP)合成萜类化合物,以植醇为代表性代谢物进行研究。
关键发现:6,6-2H2-葡萄糖喂养实验中,植醇H1(4.15 ppm)显示显著标记,富集度7.6%,为天然丰度的475倍,而H2(5.41 ppm)和H4(1.99 ppm)无标记,符合非甲羟戊酸途径 等 4 条
核心问题:阐明非经典萜类环化酶XiaF催化的隐性吲哚羟基化步骤及其进化起源,揭示其与细菌外源物脱毒酶的关系。
关键发现:XiaF是一种D组黄素依赖单加氧酶,需与黄素还原酶(XiaP或Fre)组成双组分系统才能高效催化吲哚C-3羟基化 等 7 条
核心问题:阐明十字花科植物中独特吲哚氧基化合物erucalexin及其异构体1-methoxyspirobrassinin的生物合成前体和关键重排机制。
关键发现:双重诱导可显著提高叶片中抗毒素产量,48 h时erucalexin产量为13.2–16.6 μmol/100 g鲜组织,1-methoxyspirobrassinin为3.1–3.8 μmol/100 g。氘标记实验表明,[4,5,6,7,SCD3-D7]-1-methoxybrassinin... 等 4 条
核心问题:阐明角鲨烯环化酶催化多环化反应的机理,通过底物类似物捕获碳正离子中间体,揭示环化途径和立体化学控制机制。
关键发现:(3S)-二醇18产生四个产物31-34,产率分别约为22%、21%、5%和25%,底物回收27% 等 4 条
核心问题:综述巴豆酰辅酶A羧化酶/还原酶(CCR)同源物在扩展聚酮化合物结构多样性中的新兴生物合成作用,包括其在初级和次级代谢中的功能、催化机制及工程应用。
关键发现:Rhodobacter sphaeroides CCR催化巴豆酰CoA还原羧化生成(2S)-乙基丙二酰CoA,羧化活性约为还原活性的10倍 等 6 条
核心问题:系统阐明真菌meroterpenoids(聚酮-萜杂合天然产物)的生物合成基因簇和酶促机制,并预测缺乏遗传信息的相关化合物的生物合成途径。
关键发现:['麦考酚酸生物合成中,MpaH与1-H-3-羟基-4-氧喹哪啶2,4-双加氧酶(HOD)和1-H-3-羟基-4-氧喹啉2,4-双加氧酶(QDO)仅有约15%的氨基酸序列一致性,提示其可能以类似机制催化烯烃裂解。', '在austinol生物合成中,AusF与AusJ的氨基酸序列一致性为54%...
核心问题:验证ent-kaur-16-ene和ent-kaur-16-en-15-one是否为Isodon japonicus中二萜类苦味成分ennein和oridonin的生物合成前体,并阐明C-15位功能化的机制。
关键发现:放射性示踪实验证实ent-kaur-16-ene和ent-kaur-16-en-15-one均可掺入ennein和oridonin 等 3 条
核心问题:综述1987年C5-C20萜类化合物生物合成研究进展,涵盖甲羟戊酸代谢、单萜、倍半萜和二萜的酶学与分子生物学研究。
关键发现:亮氨酸通过HMG-CoA降解进入甲羟戊酸途径,[U-14C]亮氨酸在穿心莲组织培养中掺入paniculide A的比例为15-20% 等 5 条
核心问题:系统总结1993-1995年间C5-C25萜类化合物生物合成的研究进展,涵盖甲羟戊酸途径、非甲羟戊酸途径(磷酸二羟丙酮途径)、异戊烯基转移酶、以及各类单萜、倍半萜、二萜和二倍半萜的环化酶与修饰酶。
关键发现:重组禽类HMG-CoA合酶在大肠杆菌中表达量占细胞总蛋白的20%以上,Cys-129为催化必需残基 等 7 条
核心问题:阐明霉酚酸(mycophenolic acid)的生物合成途径,特别是C-4甲基引入的时机以及萜烯侧链的构建和氧化裂解过程。
关键发现:4,6-二羟基-2,3-二甲基苯甲酸(3)摩尔掺入率54.8%,总掺入率83.5% 等 6 条