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Feeding strategies for the improved biosynthesis of canthaxanthin from enzymatic hydrolyzed molasses in the fed-batch fermentation of Dietzia natronolimnaea HS-1

作者
Seyed Mohammad Taghi Gharibzahedi, Seyed Hadi Razavi, Mohammad Mousavi
单位
Bioprocess Engineering Laboratory (BPEL), Department of Food Science, Engineering & Technology, Faculty of Agricultural Engineering and Technology, University of Tehran, P.O. Box 4111, Karaj 31587-77871, Iran
杂志
Bioresource Technology(2013)
DOI
10.1016/j.biortech.2013.12.013
所属领域
发酵工程
关键词
CanthaxanthinConstant feeding rateDietzia natronolimnaea HS-1High cell-density cultureWaste molasses
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解决的核心问题

在补料分批发酵中,如何通过优化补料策略和底物浓度来提高Dietzia natronolimnaea HS-1利用酶解糖蜜合成角黄素(CTX)的产量,以克服底物抑制和代谢物阻遏效应。

研究策略

比较恒定补料速率(CFR)与指数补料速率(EFR)两种策略,并结合不同酶解糖蜜(EHM)浓度(30、45、60 g/L),在5 L生物反应器中考察菌株生长、总类胡萝卜素(TC)和CTX合成动态,确定最佳补料条件。

研究路线图

100%
核心问题:补料策略与底物浓度如何影响CTX产量
研究策略:比较CFR与EFR补料策略
实验设计:5L反应器,EHM浓度30、45、60 g/L
关键改造:酶解糖蜜完全替代葡萄糖作为碳源
结果1:CFR(7 ml/h,45 g/L)最优
结果2:BDW 17.66 g/L,TC 16.31 mg/L,CTX 14.67 mg/L
结果3:比文献提高12.1%~22.8%,EFR效果差
结论:CFR策略+45 g/L EHM实现最高CTX产量
应用前景:EHM为葡萄糖廉价替代品,具工业潜力
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核心内容

本研究以Dietzia natronolimnaea HS-1为生产菌株,在5 L生物反应器中系统比较了恒定补料速率(CFR)与指数补料速率(EFR)两种策略,并结合30、45、60 g/L三种酶解甜菜糖蜜(EHM)浓度,考察菌株生长及角黄素(CTX)合成动态。结果显示,CFR策略在7 ml/h流速和45 g/L EHM条件下表现最优,获得最高比生长速率0.127 h⁻¹、生物量干重17.66 g/L、总类胡萝卜素16.31 mg/L和CTX 14.67 mg/L,对应CTX产率达3.07 mg/g,较文献报道分别提高22.8%、17.8%和12.1%。相比之下,EFR策略最高CTX仅为10.78 mg/L(30 g/L EHM),且随糖蜜浓度升高产量下降。研究表明,恒定补料策略可有效缓解底物抑制和代谢物阻遏效应,EHM能够完全替代葡萄糖作为廉价碳源,该工艺具备良好的工业放大潜力。

创新点

['首次系统研究碳源补料策略对Dietzia natronolimnaea HS-1合成角黄素的影响', '以酶解甜菜糖蜜(EHM)作为廉价底物完全替代葡萄糖培养基', '明确CFR策略(7 ml/h,45 g/L EHM)为最佳补料方式,显著提高CTX产量']

研究对象(2)

底盘细胞代谢通路基因蛋白功能说明
Dietzia natronolimnaea HS-1 类胡萝卜素合成途径 催化 生产菌株,可积累总类胡萝卜素中90%以上的角黄素
蔗糖水解 invertase 催化 用于酶解甜菜糖蜜中的蔗糖,生成葡萄糖和果糖

关键发现

  1. 在CFR策略(7 ml/h,45 g/L酶解糖蜜)下获得最高比生长速率0.127 h^-1、生物量干重17.66 g/L、总类胡萝卜素16.31 mg/L和CTX 14.67 mg/L
  2. 相应的生物量得率Y_X/S为3.53 g/g,TC得率3.40 mg/g,CTX得率3.07 mg/g,体积生产率Q_X为0.170 g/(L·h),Q_TC为0.163 mg/(L·h),Q_CTX为0.147 mg/(L·h)。与文献报道相比,本研究BDW、TC、CTX分别提高22.8%、17.8%、12.1%。EFR策略下最高CTX仅为10.78 mg/L(30 g/L EHM),且随EHM浓度升高而下降。

研究结论

恒定补料速率策略优于指数补料速率,在7 ml/h的恒定流速和45 g/L酶解糖蜜浓度下,D. natronolimnaea HS-1可获得14.67 mg/L的最大CTX产量,证明EHM可作为葡萄糖的廉价替代品,该策略具备工业应用潜力。