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Continuous cultivation approach for fermentative succinic acid production from crude glycerol by Basfia succiniciproducens DD1

作者
Edzard Scholten, Torsten Renz, Jochen Thomas
杂志
Biotechnology Letters(2009)
DOI
10.1007/s10529-009-0104-4
所属领域
发酵工程
关键词
Basfia succiniciproducensContinuous cultivationCrude glycerolGlycerolPasteurellaceaeSuccinic acid
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解决的核心问题

利用粗甘油通过连续发酵方式稳定生产琥珀酸,解决壁生长问题并实现长期连续运行。

研究策略

以粗甘油(5.1 g/l)为碳源,NH4OH为氮源和pH控制剂,建立甘油限制的恒化培养;通过将发酵液转移至等量新发酵罐解决壁生长问题,连续运行80天以上。

研究路线图

100%
研究问题:粗甘油连续发酵生产琥珀酸,解决壁生长
策略:甘油限制恒化培养 + NH4OH控pH
关键改造:发酵液转移法解决壁生长
结果:最高产率0.094 g/L/h,得率1.02 g/g
结论:连续培养80天稳定,具商业成本潜力
稀释率0.004-0.018 h^-1,甘油耗尽无污染
副产物:乳酸0.09-0.45 g/L,乙酸0.41-1.16 g/L
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核心内容

本研究以粗甘油为碳源,采用恒化连续培养方式实现琥珀酸的稳定生产。通过将发酵液转移至等量新发酵罐的策略,有效解决了长期运行中常见的壁生长问题,使连续培养周期超过80天且无污染和菌株退化。在稀释率0.004至0.018 h⁻¹范围内建立了甘油限制稳态,当稀释率为0.018 h⁻¹时,琥珀酸浓度达5.21 g/l,产率为0.094 g/l/h,得率高达1.02 g/g,比产率为0.375 g/g/h。副产物乳酸和乙酸分别维持在0.09-0.45 g/l和0.41-1.16 g/l的低水平,甘油被完全消耗。该连续工艺展现出优异的长期稳定性,且高产率与高比生长速率呈正相关。结合粗甘油廉价易得、无需额外氮源以及生产菌株无致病性等特点,该工艺具备显著的商业成本潜力,为琥珀酸的工业化连续生产提供了可行方案。

创新点

首次建立Basfia succiniciproducens DD1利用粗甘油的连续发酵工艺;采用发酵液转移法有效解决壁生长;连续培养可持续数月;证实高产率与高比生长速率相关。

研究对象(1)

底盘细胞代谢通路基因蛋白功能说明
Basfia succiniciproducens DD1 甘油转化为磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)再转化为琥珀酸 催化 以粗甘油为碳源,NH4OH调节pH,连续发酵生产琥珀酸

关键发现

  1. 在稀释率0.004-0.018 h^-1范围内建立甘油限制稳态,最高稀释率0.018 h^-1时,琥珀酸浓度5.21 g/l,产率0.094 g/l/h,得率1.02 g/g,比产率0.375 g/g/h
  2. 副产物乳酸0.09-0.45 g/l,乙酸0.41-1.16 g/l,甘油完全消耗
  3. 连续培养超过80天无污染和菌株不稳定。

研究结论

该连续培养工艺具有优异的稳定性,可持续数月;由于琥珀酸得率高、副产物少、粗甘油廉价及无需额外氮源,具有商业成本潜力;且生产菌株无致病性。