Enhancing the growth rate and astaxanthin yield of Haematococcus pluvialis by nuclear irradiation and high concentration of carbon dioxide stress
- 作者
- Jun Cheng, Ke Li, Zongbo Yang, Junhu Zhou, Kefa Cen
- 单位
- State Key Laboratory of Clean Energy Utilization, Zhejiang University, Hangzhou 310027, China
- 杂志
- Bioresource Technology(2016)
- DOI
- 10.1016/j.biortech.2015.12.076
- 所属领域
- 代谢工程
- 关键词
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解决的核心问题
雨生红球藻生长速率低,导致生物污染,阻碍大规模培养,且虾青素产量有待提高
研究策略
利用60Co-γ射线核辐射诱变获得快速生长突变株,再结合高浓度CO2胁迫协同强光诱导提高虾青素和脂质产量
核心内容
本研究针对雨生红球藻生长速率低、易受生物污染且虾青素产量不足的问题,首次采用60Co-γ射线核辐射诱变筛选快速生长突变株,并进一步结合高浓度CO₂与强光协同胁迫诱导虾青素和脂质积累。经4000 Gy剂量诱变后,突变株平均比生长速率较原始株提高15%;在6% CO₂条件下最大比生长速率达0.60/天,峰值生物量生产率为0.16 g/L/天,较空气条件提高82%,CO₂固定率峰值达0.61 g/L/天,为野生型在空气条件下的2.1倍。在6% CO₂与108 μmol photons m⁻² s⁻¹强光诱导下,突变株虾青素产量达46.0 mg/L,脂质含量为45.9%,分别为野生型的2.4倍和1.3倍;叶绿素与类胡萝卜素含量亦显著提升。透射电镜观察揭示了细胞超微结构变化与碳分配机制。结果表明核诱变结合高浓度CO₂胁迫能有效协同提升生物量与虾青素产量,为雨生红球藻大规模培养提供了可行策略。
创新点
首次将60Co-γ射线核辐射用于雨生红球藻诱变;结合高浓度CO2与强光协同诱导提升虾青素产量;利用TEM揭示细胞超微结构变化与碳分配机制
研究对象(8)
| 底盘细胞 | 代谢通路 | 基因 | 蛋白 | 功能 | 说明 |
|---|---|---|---|---|---|
| Haematococcus pluvialis FACHB-872 | 卡尔文循环 | — | RuBisCO | 催化 | γ射线辐照上调其表达,提高光合固碳效率 |
| Haematococcus pluvialis FACHB-872 | 光合磷酸化 | — | ATP合酶 | 能量供给 | 能量代谢相关蛋白,可能被γ射线诱变上调表达 |
| Haematococcus pluvialis FACHB-872 | 5-氨基乙酰丙酸合成 | — | 谷氨酸-1-半醛-2,1-氨基变位酶 | 催化 | 参与叶绿素前体合成,受γ射线影响 |
| Haematococcus pluvialis FACHB-872 | 光合作用光反应 | — | 光捕获叶绿素a/b结合蛋白 | 能量供给 | 负责光能吸收与传递,表达量上调 |
| Haematococcus pluvialis FACHB-872 | pH稳态 | — | V-ATPase | 转运 | 将质子泵入液泡,维持胞内pH,与高CO2耐受相关 |
| Haematococcus pluvialis FACHB-872 | 三酰甘油合成 | — | 二酰甘油酰基转移酶(DGAT) | 催化 | 可能催化虾青素酯化,促进虾青素积累 |
| Haematococcus pluvialis FACHB-872 | 虾青素合成 | bkt, pds | — | 催化 | 文献提及通过克隆转化可提高虾青素含量,本研究未直接操作 |
| Haematococcus pluvialis FACHB-872 | 光合作用 | — | 光系统II D1蛋白 | 调控 | 虾青素保护D1蛋白免受强光损伤 |
关键发现
- 4000Gy γ射线诱变株的平均比生长速率比原始株提高15%
- 突变株在6% CO2下最大比生长速率为0.60/d
- 峰值生物量生产率为0.16 g/L/d,比空气条件高82%
- 在6% CO2和强光(108 μmol photons m^-2 s^-1)诱导下,虾青素产量达46.0 mg/L,脂质含量45.9%,分别是野生型的2.4倍和1.3倍
- 突变株在6% CO2下生物量干重0.65 g/L,比空气高30%
- CO2固定率峰值0.61 g/L/d,是野生型空气的2.1倍
- 叶绿素和类胡萝卜素含量分别为21.1 mg/L和7.2 mg/L,比野生型空气高23%和63%
研究结论
核诱变结合高浓度CO2胁迫可有效提高雨生红球藻的生物量和虾青素产量,突变株在6% CO2和强光下表现出最佳性能,为大规模培养提供新策略