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High-efficient production of biobutanol by a novel Clostridium sp. strain WST with uncontrolled pH strategy

作者
Sabarathinam Shanmugam, Chongran Sun, Xiaoming Zeng, Yi-Rui Wu
单位
Department of Biology, Shantou University, Shantou, Guangdong, China 515063; STU-UNIVPM Joint Algal Research Center, Shantou University, Shantou, Guangdong, China 515063
杂志
Bioresource Technology(2018)
DOI
10.1016/j.biortech.2018.02.077
所属领域
发酵工程
关键词
ButanolClostridium sp.High yieldMicrobial fermentationpH control
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解决的核心问题

生物丁醇生产中产量低、依赖pH控制、副产物多等问题阻碍工业化,需要开发高产、低成本的新菌株和发酵策略。

研究策略

从红树林沉积物中分离鉴定新菌株Clostridium sp. WST,利用30 g/L葡萄糖或半乳糖作为底物进行批式发酵,考察在不控制pH条件下的丁醇产量、产率及自我调控能力。

研究路线图

100%
研究问题
丁醇产量低、依赖pH控制、副产物多
研究策略
分离新菌株WST并考察不控pH批式发酵
关键改造
菌株固有强pH自调控、无需外部控制
结果-葡萄糖
丁醇16.62 g/L、产率0.54 g/g、氢12.08 L/L
结果-半乳糖
丁醇12.11 g/L、产率0.55 g/g、氢4.22 L/L
结果-对照
pH5.0与不控pH产量相近、副产物可忽略
结论
WST产率最高、无需pH控制、经济可行
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核心内容

从红树林沉积物中分离获得一株新型梭菌Clostridium sp. WST,并系统评估其在不控制pH条件下利用葡萄糖和半乳糖生产生物丁醇的能力。以30 g/L葡萄糖为底物时,丁醇产量达16.62 g/L,产率0.54 g/g,同时产生12.08 L/L生物氢;以30 g/L半乳糖为底物时,丁醇产量12.11 g/L,产率0.55 g/g,该半乳糖产率显著高于已有报道。研究发现该菌株具备固有的强pH自我调控能力,完全无需外部pH控制,其丁醇产量与恒定pH 5.0条件(葡萄糖16.40 g/L、半乳糖11.86 g/L)相当,而pH升至7.0则抑制生长和产物合成。发酵过程中乙酸和丁酸最终降至可忽略水平,乙醇生成极少,副产物大幅削减。结果表明,WST菌株在低浓度底物下即实现目前梭菌批式发酵中的最高丁醇产率,且免除了pH控制步骤,具备显著降低生产成本、简化工艺的工业化潜力,为可持续生物丁醇生产提供了经济可行的新方案。

创新点

发现新菌株WST具有极高的丁醇产率(葡萄糖0.54 g/g、半乳糖0.55 g/g),其中半乳糖产率显著高于已有报道;菌株固有强pH调控系统使其完全无需外部pH控制;副产物(乙醇和有机酸)生成量可忽略不计。

研究对象(2)

底盘细胞代谢通路基因蛋白功能说明
Clostridium sp. WST ABE途径(丙酮-丁醇-乙醇) 催化 利用葡萄糖和半乳糖通过ABE途径合成丁醇,产量和产率为已报道最高。
Clostridium sp. WST 调控 菌株固有的强pH自调控系统,使发酵无需外部pH控制即可高效产丁醇。

关键发现

  1. 利用30 g/L葡萄糖时,丁醇产量达16.62 g/L,产率0.54 g/g,生物氢12.08 L/L,最大OD600为8.95
  2. 利用30 g/L半乳糖时,丁醇产量达12.11 g/L,产率0.55 g/g,生物氢4.22 L/L,最大OD600为5.20。在pH控制为5.0时,葡萄糖和半乳糖的丁醇产量分别为16.40和11.86 g/L,与不控制pH的16.62和12.11 g/L相近
  3. pH升高至7.0则抑制生长并降低丁醇产量。发酵过程中乙酸和丁酸最终降至可忽略水平,乙醇生成量极少。

研究结论

新分离的Clostridium sp. WST能在低浓度底物(30 g/L)下高效生产丁醇,其产率为已报道Clostridial菌株批式发酵中的最高值;该菌株具有强自我pH调控系统,无需外部pH控制,且副产物极少,具备经济可行的工业规模可持续生物丁醇生产潜力。