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PRODUCTION OF ARTEMISININ IN TISSUE CULTURES OF ARTEMISIA ANNUA

作者
M.S.R. NAIR, NANCY ACTON, DANIEL L. KLAYMAN, KAROLYN KENDRICK, DOMINICK V. BASILE, SETH MANTE
单位
Division of Experimental Therapeutics, Walter Reed Army Institute of Research, Washington, DC 20307-5100; Department of Biology, Herbert H. Lehman College of CUNY, Bronx, New York 10468; The New York Botanical Garden, Bronx, New York 10458
杂志
Journal of Natural Products(1986)
DOI
10.1021/np50045a021
所属领域
植物组织培养
关键词
悬浮培养抗疟药物组织培养青蒿素黄花蒿
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解决的核心问题

青蒿素是有效的抗疟药物,但黄花蒿中含量低且化学合成不经济,需要开发可行的替代生产方法。本研究旨在评估利用组织培养技术生产青蒿素的可行性。

研究策略

利用黄花蒿的茎、叶和花蕾等外植体,在改良MS或B5培养基上诱导愈伤组织、根、芽及再生植株,并建立细胞悬浮培养体系;采用HPLC-电化学检测(EC)法对培养物及培养液中的青蒿素进行定性定量分析。

研究路线图

100%
研究问题
青蒿素来源受限,需替代生产途径
策略
利用黄花蒿外植体建立组织培养
外植体来源
茎、叶、花蕾
培养基体系
改良MS/B5培养基
关键改造
建立细胞悬浮培养体系
检测方法
HPLC-电化学检测(EC)
结果
根和再生植株中有青蒿素
悬浮培养液浓度约8 μg/mL
结论
组织培养可生产青蒿素,悬浮体系具放大潜力
移栽存活率达98%
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核心内容

本研究利用黄花蒿(Artemisia annua)茎、叶和花蕾外植体,在改良MS或B5培养基上诱导愈伤组织、根、芽及再生植株,并建立细胞悬浮培养体系,采用HPLC-电化学检测法对培养物及培养液中的青蒿素进行定性定量分析。结果显示,叶片外植体诱导的根和再生植株中检测到青蒿素,而愈伤组织和未生根芽中未检出;悬浮培养液中的青蒿素浓度约为8 μg/mL。叶片中青蒿素含量在中国品种中为0.01%–0.5%(干重),美国收集植株最高约0.06%,而本研究中再生植株移栽存活率达98%。这是首次在黄花蒿组织培养的根和再生植株中检测到青蒿素,并发现悬浮培养细胞可将青蒿素释放到培养液中。该结果表明组织培养技术可用于青蒿素生产,且悬浮培养体系具有放大潜力,通过优化培养基和培养条件有望提高产量,为青蒿素的经济生产提供了新途径。

创新点

首次在黄花蒿组织培养的根和再生植株中检测到青蒿素,并发现悬浮培养细胞将青蒿素释放到培养液中,为大规模生产青蒿素提供了新途径。

研究对象(2)

底盘细胞代谢通路基因蛋白功能说明
Artemisia annua(黄花蒿)叶片外植体诱导的根及再生植株 青蒿素生物合成 催化 在根和再生植株中检测到青蒿素,但未鉴定具体酶
Artemisia annua 细胞悬浮培养系 青蒿素生物合成 转运 青蒿素被释放到培养液中,浓度约8 μg/mL

关键发现

  1. 黄花蒿叶片中青蒿素含量在中国品种为0.01%-0.5%(干重),美国收集的植株最高约0.06%
  2. 本研究中由叶外植体诱导的根和再生植株中检测到青蒿素,而愈伤组织和未生根芽中未检出
  3. 悬浮培养液中的青蒿素浓度约为8 μg/mL
  4. 再生植株移栽存活率达98%。

研究结论

组织培养技术可以生产青蒿素,且悬浮培养体系具有放大生产的潜力;通过优化培养基和培养条件有望提高产量,为青蒿素的经济生产提供可能。