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α-Copaene is a potent repellent against the Asian Citrus Psyllid Diaphorina citri

作者
Rodrigo Facchini Magnani, Haroldo Xavier Linhares Volpe, Rejane Angélica Grigio Luvizotto, Tatiana Aparecida Mulinari, Thiago Trevisoli Agostini, Jairo Kenupp Bastos, Victor Pena Ribeiro, Michele Carmo-Sousa, Nelson Arno Wulff, Leandro Peña, Walter S. Leal
杂志
Scientific Reports(2025)
DOI
10.1038/s41598-025-86369-1
所属领域
化学生态学 / 昆虫行为学 / 植物保护
关键词
At5g44630Copaiba oilDynamic releaserRepellentα-copaeneα-humuleneβ-caryophyllene
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解决的核心问题

亚洲柑橘木虱(Diaphorina citri)是柑橘黄龙病(HLB)的主要传播媒介,需要开发高效、环保的驱避剂以用于push-pull防治策略。本文旨在探究转基因拟南芥释放的倍半萜类挥发物中,除β-caryophyllene外是否还有其他强效驱避成分,并评估其应用潜力。

研究策略

利用TD-GC-MS分析过表达倍半萜合酶基因的转基因拟南芥释放的挥发性有机物,鉴定各倍半萜成分及比例;通过多臂嗅觉仪行为学实验分别测试α-copaene、α-humulene、β-caryophyllene及其混合物的驱避活性;并验证商业苦配巴油是否具有同等驱避效果。

研究路线图

100%
研究问题:ACP驱避剂筛选
策略:TD-GC-MS分析+行为学测试
关键改造①:鉴定α-copaene驱避活性
关键改造②:验证天然苦配巴油效果
结果:驱避效果量化与比例分析
结论:α-copaene高效驱避ACP
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核心内容

本研究针对柑橘黄龙病媒介亚洲柑橘木虱的高效驱避剂需求,利用TD-GC-MS分析了过表达倍半萜合酶基因的转基因拟南芥释放的挥发性成分,发现其释放的α-copaene、β-caryophyllene和α-humulene比例为0.95:100:9.82。多臂嗅觉仪行为实验表明,α-copaene在0.9~2.1 ng/μl的低剂量下即可显著驱避雌性木虱(p=0.0042~0.0210),有效浓度比β-caryophyllene(0.17 μg/μl)低约100倍,释放率仅需0.80±0.04 ng/min,而α-humulene在所测剂量下无活性。混合实验中,低剂量β-caryophyllene与α-copaene(0.13 μg/μl加1.3 ng/μl)保持驱避效果,但高剂量混合时因嗅觉饱和而失效。商业苦配巴油稀释3500倍后显著驱避木虱(处理组停留3.98±0.28 min对对照组6.02±0.28 min,p=0.0005),其有效成分释放模式与转基因植物相近。α-copaene具备远超已知驱避剂的效力,转基因植物和苦配巴油均可作为可持续驱避剂来源,为柑橘黄龙病的push-pull防控策略提供了实用方案。

创新点

['首次发现α-copaene是比β-caryophyllene强约100倍的亚洲柑橘木虱驱避剂,有效剂量低至0.9 ng/μl。', '明确了转基因拟南芥释放的倍半萜比例为α-copaene:β-caryophyllene:α-humulene ≈ 1:100:10,并证明α-humulene在所释放剂量下无驱避活性。', '证明商业苦配巴油因含有相近比例的三种倍半萜,可经简单稀释后直接用作ACP驱避剂。']

研究对象(2)

底盘细胞代谢通路基因蛋白功能说明
转基因拟南芥 倍半萜生物合成 At5g44630 倍半萜合酶 催化 关键词中提到的倍半萜合酶基因,过表达后产生α-copaene、β-caryophyllene、α-humulene及痕量β-elemene。
转基因拟南芥 倍半萜生物合成 At5g23960 β-石竹烯合酶 催化 方法学中明确指出该过表达系为At5g23960,催化FPP环化生成多种倍半萜。

关键发现

  1. α-copaene在0.9~2.1 ng/μl源剂量下显著驱避ACP雌虫(p=0.0042~0.0210),有效浓度比β-caryophyllene(0.17 μg/μl)低约100倍,释放率仅需0.80±0.04 ng/min;β-caryophyllene动态释放装置中有效剂量为0.17 μg/μl,释放率0.044±0.013 μg/min;转基因拟南芥释放α-copaene、β-caryophyllene、α-humulene的比例为0.95±0.06 : 100 :
  2. 82±0.44;β-caryophyllene与α-copaene混合时(0.13 μg/μl +
  3. 3 ng/μl)仍显著驱避(p=0.0391),而两者高剂量混合(0.17 μg/μl +
  4. 7 ng/μl)时无显著驱避(p=0.6841),推测嗅觉系统饱和;苦配巴油稀释3500倍后显著驱避ACP,处理组停留3.98±0.28 min vs 对照组6.02±0.28 min(p=0.0005),其β-caryophyllene和α-copaene释放率分别为67±3 ng/min和8.4±0.1 ng/min。

研究结论

α-copaene是比β-caryophyllene更有效的ACP驱避剂,在极低剂量下即可发挥作用;转基因植物(如过表达At5g44630/At5g23960的拟南芥)及天然苦配巴油均可作为ACP驱避剂的可持续来源,可结合诱捕植物应用于push-pull综合治理策略。