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Studies in Carotenogenesis 14. CAROTENOID SYNTHESIS IN THE PHOTOSYNTHETIC BACTERIUM RHODOPSEUDOMONAS SPHEROIDES

作者
T. W. GOODWIN, D. G. LAND, H. G. OSMAN
单位
Department of Biochemistry, The University, Liverpool 3
杂志
Biochemical Journal(1955)
DOI
10.1042/bj0590491
所属领域
微生物代谢
关键词
Rhodopseudomonas spheroidesbiosynthesiscarotenoidsdiphenylaminephotosynthetic bacteriapigment Rpigment Y
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解决的核心问题

研究光合细菌Rhodopseudomonas spheroides中类胡萝卜素Y和R的合成及其在有氧/无氧条件下的转化机制。

研究策略

通过比较厌氧和好氧培养条件下的色素组成,利用色谱分离鉴定色素,使用二苯胺及多种代谢抑制剂研究色素合成的调控,并观察洗涤细胞悬浮液中的色素变化。

研究路线图

100%
研究问题
色素组成分析
厌氧/好氧培养对比
抑制剂实验
洗涤细胞观察
氧气诱导R积累
二苯胺延迟抑制
抑制剂不敏感性
结论:R从头合成
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核心内容

该研究以光合细菌荚膜红假单胞菌(Rhodopseudomonas spheroides)为对象,系统考察了有氧与无氧条件下两种主要类胡萝卜素——黄色素Y和红色素R的合成与转化规律。通过在厌氧、好氧培养及洗涤细胞悬浮液中比较色素组成,并结合色谱分离与多种代谢抑制剂处理,作者发现氧气强烈促进R积累并伴随Y下降:厌氧培养第2天Y浓度(2.40 mg/g干重)约为R(0.86 mg/g)的2.8倍,转好氧后24小时内R从0.95升至1.36 mg/g,Y则从2.38降至1.59 mg/g;而好氧培养中R(2.11 mg/g)约为Y(0.88 mg/g)的2.4倍。该转化对亚砷酸盐、2,4-二硝基酚等抑制剂不敏感,但10^-1 M KCN可使R生成量降至对照的31%。此外,1/70,000浓度二苯胺在延迟约6-7天后才抑制生长与色素合成,且未检测到饱和多烯中间体。结果表明R的积累更可能源于从头合成而非Y的直接转化,且二苯胺的延迟效应暗示存在未知的调控机制,说明该菌的类胡萝卜素合成途径与深红红螺菌(Rsp. rubrum)存在本质差异。

创新点

发现氧气诱导红色素R的积累和黄色素Y的消失,且该过程对多种代谢抑制剂不敏感;二苯胺独特地延迟抑制生长和色素合成但最终恢复;提出Y不一定直接转化为R,R可能从头合成的观点。

研究对象(1)

底盘细胞代谢通路基因蛋白功能说明
Rhodopseudomonas spheroides 类胡萝卜素生物合成途径 催化 研究该菌中黄色素Y和红色素R的合成与调控

关键发现

  1. 确认Rhodopseudomonas spheroides含有两种主要类胡萝卜素Y和R
  2. 厌氧培养中Y浓度约为R的2.8倍(如第2天Y=2.40 mg/g干重,R=0.86 mg/g),好氧培养中R约为Y的2.4倍(如第2天R=2.11 mg/g,Y=0.88 mg/g)
  3. 转好氧后R增加、Y减少,光下24h内R从0.95升至1.36 mg/g,Y从2.38降至1.59 mg/g
  4. 1/70,000浓度二苯胺抑制生长和色素合成约6-7天后恢复正常,未检测到饱和多烯
  5. 10^-2 M KCN使R生成量为对照的84%,10^-1 M KCN为31%
  6. 色素变化对亚砷酸盐、2,4-二硝基酚、磺胺等抑制剂不敏感。

研究结论

R. spheroides的类胡萝卜素合成与Rsp. rubrum不同;有氧条件下R的积累可能源于从头合成而非Y的直接转化;二苯胺的延迟抑制效应暗示存在未知调控机制。