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EFFECT OF AGITATION AND AERATION ON THE CITRIC ACID PRODUCTION BY Yarrowia lipolytica GROWN ON GLYCEROL

作者
Anita Rywińska, Izabela Musiał, Waldemar Rymowicz, Barbara Żarowska, Tomasz Boruczkowski
单位
Department of Biotechnology and Food Microbiology, Wrocław University of Environmental and Life Sciences, Wrocław, Poland; Department of Food Storage and Technology, Wrocław University of Environmental and Life Sciences, Wrocław, Poland
杂志
Preparative Biochemistry and Biotechnology(2012)
DOI
10.1080/10826068.2012.656868
所属领域
发酵工程
关键词
Yarrowia lipolyticaaeration rateagitation ratecitric aciddissolved oxygen concentrationglycerol
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解决的核心问题

确定利用甘油生产柠檬酸的 Yarrowia lipolytica 菌株所需的最佳搅拌和通气条件。

研究策略

在 5L 搅拌罐反应器中,改变搅拌速率(400–900 rpm)和通气速率(0.18–0.6 vvm),评估对生物量、柠檬酸产量、溶氧(DO)以及细胞形态的影响。

研究路线图

100%
研究问题:确定柠檬酸生产的最佳搅拌与通气条件
策略:5L罐反应器中改变搅拌(400–900 rpm)与通气(0.18–0.6 vvm)
关键改造:乙酸盐阴性突变体(Wratislavia 1.31与AWG7)利用甘油
结果一:最佳条件为搅拌800–900 rpm、通气0.24–0.48 vvm、DO≥40%
结果二:最高柠檬酸浓度92.8 g/L、产率0.63 g/g、体积产率1.15 g/L·h
结果三:低搅拌(400 rpm)致酵母-菌丝转变,异柠檬酸比例随DO升高而降低
结论:最佳条件为搅拌800–900 rpm、通气0.24–0.36 vvm、DO 50–80%,DO是决定因素
附加说明:研究菌株为Wratislavia 1.31(高产)与AWG7,均为乙酸盐阴性突变体
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核心内容

本研究在5 L搅拌罐反应器中系统考察了搅拌速率(400–900 rpm)和通气速率(0.18–0.6 vvm)对两株解脂耶氏酵母(Yarrowia lipolytica)Wratislavia 1.31和AWG7以甘油为底物发酵生产柠檬酸的影响。结果显示,搅拌速率800–900 rpm、通气速率0.24–0.48 vvm为最优条件,此时溶氧水平维持在40%以上。在此条件下,Wratislavia 1.31在0.24 vvm通气时获得最高柠檬酸浓度92.8 g/L,产率达0.63 g/g;在0.48 vvm时体积产率最高达1.15 g/L·h。低搅拌速率(400 rpm)会导致酵母细胞向菌丝形态转变,显著降低产酸量。同时,溶氧水平升高可降低副产物异柠檬酸的比例。研究明确了溶氧饱和度是甘油转化为柠檬酸的关键决定因素,建议将DO维持在50–80%以确保高效生产,为大规模发酵工艺优化提供了重要依据。

创新点

系统研究了乙酸盐阴性突变体 Wratislavia 1.31 和 AWG7 在甘油底物上的搅拌/通气条件,确定 DO>40% 是柠檬酸生物合成的关键,并获得了较高的柠檬酸浓度和产率。

研究对象(2)

底盘细胞代谢通路基因蛋白功能说明
Yarrowia lipolytica Wratislavia 1.31 柠檬酸生物合成(TCA循环) 调控 乙酸盐阴性突变体,高产柠檬酸菌株
Yarrowia lipolytica Wratislavia AWG7 柠檬酸生物合成(TCA循环) 调控 乙酸盐阴性突变体,光滑菌落表型

关键发现

  1. 最佳搅拌速率为 800–900 rpm,通气速率为
  2. 24–0.48 vvm,此时 DO 高于 40%;最高柠檬酸浓度
  3. 8 g/L(Wratislavia
  4. 31,0.24 vvm),最高产率
  5. 63 g/g,最高体积产率
  6. 15 g/L·h、比产率
  7. 071 g/g·h(0.48 vvm);低搅拌(400 rpm)导致酵母-菌丝转变和低产量;异柠檬酸比例随 DO 升高而降低。

研究结论

甘油转化为柠檬酸的最佳操作条件为搅拌 800–900 rpm、通气 0.24–0.36 vvm,DO 维持在 50–80%;空气饱和度是决定因素,影响生物量、柠檬酸产量及柠檬酸/异柠檬酸比例。